Титры антител инфекционный бронхит кур
М.В. Гирин, Д.С. Сурнев, Д.А. Лозовой, В.В. Ельников (ОАО «Покровский завод биопрепаратов»)
РЕЗЮМЕ
На основе данных эпизоотического мониторинга распространения вируса инфекционного бронхита кур (ИБК) на территории РФ научно обоснована стратегия выбора компонентного состава ассоциированной инактивированной эмульсионной вакцины против НБ, ИБК и ССЯ-76, содержащей полиштаммную композицию по ком поненту ИБК. Вакцина содержит вирусы ИБК антигенно родственные серотипу Массачусетс, 793/В российскому варианту и предназначена для бустерной вакцинации промышленной и родительской несушки в птицехозяйствах, где циркулируют вариантные штаммы вируса ИБК. При изготовлении вакцины используются эмбрионы от СПФ-кур. Испытания полученной вакцины показали ее высокую иммуногенность и низкую реактогенность, что позволяет обеспечивать длительный и напряженный иммунитет, а также передачу материнских антител потомству.
ВВЕДЕНИЕ
Инфекционный бронхит кур (ИБК) является высококонтагиозным заболеванием, наносящим существенный ущерб промышленному птицеводству. Вирус ИБК поражает верхние дыхательные пути, репродуктивные органы и вызывает нефрозо-нефриты. У взрослых несушек отмечают спад яичной продуктивности, деформацию и обесцвечивание скорлупы, разжижение яичного белка и снижение выводимости [2].
Возбудитель ИБК – коронавирус – чрезвычайно изменчив. Небольшие замены в гене S1 приводят к появлению новых антигенных вариантов вируса [2, 4].
Проведенный в 2003–2004 г.г. на территории РФ мониторинг с помощью ОТ-ПЦР и секвенирования указывает на доминирующее распространение изолятов (около 40%) генотипа Массачусетс. Также довольно часто (5–15%) встречаются изоляты генотипа 793/В, D274, QX, B1648. Кроме того, 27% проб не были отнесены к ранее известным генотипам и составили российскую группу [1]. При дальнейшем мониторинге в 2006 г. был выявлен полевой изолят вируса ИБК, относящийся к генотипу Арканзас [1]. Данное распределение изолятов на территории РФ несколько отличается от распределения на территории ЕС, где доминирует генотип 793/В (33%) , Массачусетс (25%) и Италия-02 (13%) [5].
Рисунок 1 Распределение генотипов вируса ИБК на территории РФ и ЕС в 2006 г.
В дальнейшем возможно изменение картины распределения в связи с глобализацией птицеводства и завозом молодняка птицы из-за рубежа, преимущественно из Европы, а также в результате участившегося использования вакцин на основе серотипа 793/B и D274 импортного производства, которые могут послужить причиной возникновения полевых вирусов ИБК [4].
Как правило, защита птицепоголовья основана на применении живых и инактивированных вакцин против ИБК из штаммов серотипа Массачусетс. Их протективная активность против гомологичных полевых изолятов хорошо изучена, однако они обеспечивают лишь частичную защиту от заражения вариантными вирусами ИБК (70% защиты от вирусов, относящихся к группе QX, 60% – от австралийских вариантов) [3].
Рисунок 2 Эффективность защиты птицы, привитой вакцинами серотипа Массачусетс
В связи с этим перед нами стояла задача создания вакцинного препарата для несушек и родителей не только обеспечивающего защиту от особоопасных (НБ) и распространённых заболеваний (ИБК, ССЯ-76), но и создающего надежную защиту от вирусов ИБК, не принадлежащих к серотипу Массачусетс и составляющих больше половины российских изолятов.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Вирусное сырье:
Вирусы ИБК. При изготовлении серии вакцины были использованы штаммы «Чапаевский», «Таганрогский» и «Калужский», антигенно родственные серотипу Массачусетс, 793/B и российскому варианту, соответственно. Вирусы ИБК культивировали в развивающихся эмбрионах СПФ-кур (Lohman Tierzucht, Германия), инактивацию проводили β-пропиолактоном. Инфекционная активность вирусов ИБК до инактивации была не ниже 7,0 lg ЭИД50/см3.
Вирус НБ. Использован штамм «Ла-Сота» с активностью в РГА не ниже 9 log2. Вирус культивировали в развивающихся эмбрионах СПФ-кур (Lohman Tierzucht, Германия), инактивацию проводили β-пропиолактоном.
Вирус ССЯ-76. Использован штамм «B8/78» с активностью в РГА не ниже 15 log2. Вирус культивировали в развивающихся эмбрионах уток, инактивацию проводили β-пропиолактоном.
Масляный адъювант: при изготовлении вакцин использован адъювант Montanide ISA 70 VG (SEPPIC, Франция).
Подопытная птица: использовали цыплят кросса Хай-Лайн-98 90-суточного возраста из промышленного птицехозяйства. На птицефабрике птица была трёхкратно привита против ИБК живой вакциной из штамма Н-120 и двукратно против НБ вакциной из шт. Ла-Сота методом выпойки. Образцы испытуемых вакцин вводили в грудную мышцу по 0,5 см3. В опытных и контрольной группах было по 25 голов.
Контроль иммунитета. Антитела к вирусу ИБК определяли методом ИФА на наборах Synbiotics, для определения титров антител к НБ и ССЯ-76 использовали РТГА, которую проводили согласно общепринятой методике.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Средние титры антител по опытным и контрольной группам представлены в табл. 1.
Таблица 1 Формирование иммунного ответа на введение образцов ассоциированной инактивированной эмульсионной вакцины против НБ, ИБК и ССЯ-76
Вакцина | Доза см3 | Компонент (реакция) | Титр антител до вакцинации | Титр антител после вакцинации | ||||
через 28сут. | через 60 сут. | через 90 сут. | через 150 сут. | через 300 сут. | ||||
Экспериментальный образец PELTARION Pro Poultry ND+IB multy +EDS | 0,5 | НБ (РТГА) | 5,3±0,2 1072±100 н.о. | 9,8±1,4 | 11,3±1,4 | 11,8±1,4 | 11,9±1,8 | 9,5±0,1 |
ИБК (ИФА) | 5267±243 | 5432±567 | 5597±818 | 5490±25 | 5260±537 | |||
ССЯ-76 (РТГА) | 9,8±0,0 | 10,0±1,4 | 10,2±1,1 | 8,9±1,2 | 8,4±1,0 | |||
НБ + ИБК мульти + ССЯ-76 Серия №3 (от 09.2007) | 0,5 | НБ (РТГА) | 10,4±0,6 | 10,7±0,4 | 11,0±1,5 | 11,3±1,6 | 9,6±1,4 | |
ИБК (ИФА) | 4953±508 | 5243±222 | 5380±140 | 5320±385 | 5150±676 | |||
ССЯ-76 (РТГА) | 9,6±0,2 | 9,9±0,3 | 10,2±0,1 | 9,8±1,1 | 9,1±0,4 | |||
Контроль | — | НБ (РТГА) | 4,8±0,2 | 4,2±0,5 | 3,6±0,1 | 3,0±0,0 | 2,4±0,1 | |
ИБК (ИФА) | 761±24 | 492±22 | 223±31 | 430±57 | 400±124 | |||
ССЯ-76 (РТГА) | н.о.* | н.о. | н.о. | н.о. | н.о. | |||
*Примечание: н.о. – не обнаружено
Как видно из таблицы 1, экспериментальный образец полиштаммной вакцины и серийная вакцина показали высокую иммуногенную активность. Вируснейтрализующие антитела в защитных титрах формировались на 28 день после вакцинации. После выхода на максимальный уровень на 60 сутки после прививки, титры антител плавно снижались и обеспечивали требуемый протективный уровень по всем прививаемым компонентам до 300 дней после прививки. В контрольной группе уровень антител существенно не увеличивался (р<0,05). Стоит отметить, что серийная вакцина из штамма «Чапаевский» (серотип Массачусетс) вызывала выработку примерно одинакового уровня антител к вирусу ИБК, что и полиштаммная вакцина PELTARION Pro Poultry ND + IB multy + EDS. Это говорит о высоких антигенных свойствах нового препарата.
Образцы вакцины были безвредны и не вызывали выраженной и длительной воспалительной реакции в месте введения.
Л И Т Е Р А Т У Р Ы
1. Овчинникова Е.В., Бочков Ю.А., Батченко Г.В. и др. Генетическая характеристика полевых изолятов вируса инфекционного бронхита кур, выявленных в России. Труды Федерального центра охраны здоровья животных. 2007. Т. 5. С. 303–315.
2. Cavanagh, D. & Naqi, S.A. (2003). Infectious bronchitis. In Saif, Y. M., Barnes, H. J., Fadly, A. M., Glisson, J. R., McDougald, L. R. & Swayne, D. E. (eds) Diseases of Poultry, 11th edition, Ames, Iowa State University Press, pp. 101–119.
3. Cook J.K.A., Orbell S.J., Woods M. and Huggins M. Breadth of protection of the respiratory tract provided by different live-attenuated infectious bronchitis vaccines against challenge with infectious bronchitis viruses of heterologous serotypes. // Avian Pathology, Vol. 28, pp.477–485.
4. Ignjatovic J., Gould G., Sapats S. et al. . Isolation of a variant infectious bronchitis virus in Australia that further illustrates diversity among emerging strains // Arc. Virol. – 2006. Vol. 151. pp. 1567–1585.
5. Worthington, K.J., Currie, R.J.W. & Jones, R.C. A reverse transcriptase-polymerase chain reaction survey of infectious bronchitis virus genotypes in Western Europe from 2002 to 2006. // Avian Pathology, V. 37, – P. 274–257.
Подготовлено по материалам «Vого Международного Ветеринарного Конгресса по Птицеводству» для webmvc.com
Источник
ÌÅÒÎÄÈ×ÅÑÊÈÅ ÓÊÀÇÀÍÈß
äëÿ âûÿâëåíèÿ àíòèòåë ê âèðóñó
èíôåêöèîííîãî áðîíõèòà êóð
èììóíîôåðìåíòíûì àíàëèçîì
1. ÎÁÙÈÅ ÏÎËÎÆÅÍÈß
2. ÏÎÐßÄÎÊ ÏÐÈÌÅÍÅÍÈß
3. ÏÎÄÃÎÒÎÂÊÀ ÊÎÍÏÎÍÅÍÒÎÂ ÍÀÁÎÐÀ È ÎÁÎÐÓÄÎÂÀÍÈß ÄËß ÏÐÎÂÅÄÅÍÈß ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈÉ
4. ÏÐÎÂÅÄÅÍÈÅ ÈÌÌÍÓÍÎÔÅÐÌÅÍÒÍÎÃÎ ÀÍÀËÈÇÀ
5. Ó×ÅÒ ÐÅÇÓËÜÒÀÒΠÐÅÀÊÖÈÈ
6. ÎÖÅÍÊÀ ÐÅÇÓËÜÒÀÒÎÂ ÐÅÀÊÖÈÈ
ÌÈÍÈÑÒÅÐÑÒÂÎ
ÑÅËÜÑÊÎÃÎ ÕÎÇßÉÑÒÂÀ ÓÒÂÅÐÆÄÀÞ
ÐÎÑÑÈÉÑÊÎÉ ÔÅÄÅÐÀÖÈÈ Çàì.íà÷àëüíèêà
Äåïàðòàìåíòà âåòåðèíàðèè
ÃËÀÂÍÎÅ ÓÏÐÀÂËÅÍÈÅ ÂÅÒÅÐÈÍÀÐÈÈ
N 13-7-2/1222 27 àïðåëÿ 1998 ã.
ÌÅÒÎÄÈ×ÅÑÊÈÅ ÓÊÀÇÀÍÈß
äëÿ âûÿâëåíèÿ àíòèòåë ê âèðó-
ñó èíôåêöèîííîãî áðîíõèòà êóð
èììóíîôåðìåíòíûì àíàëèçîì
1. ÎÁÙÈÅ ÏÎËÎÆÅÍÈß
1.1. Ñïåöèôè÷åñêèå àíòèòåëà ê âèðóñó èíôåêöèîííîãî áðîíõèòà
êóð (ÈÁÊ) âûÿâëÿþò â ñûâîðîòêàõ êðîâè ñ ïîìîùüþ íàáîðà
êîìïîíåíòîâ èììóíîôåðìåíòíûì àíàëèçîì (ÈÔÀ). Äëÿ ðåòðîñïåêòèâíîé
äèàãíîñòèêè áîëåçíè ó íåâàêöèíèðîâàííîãî ïòèöåïîãîëîâüÿ è
êîíòðîëÿ íàïðÿæåííîñòè ïîñòâàêöèíàëüíîãî èììóíèòåòà.
1.2. Â ñîñòàâ íàáîðà âõîäÿò:
— Êîìïîíåíò N1 (Ê1) — ïîëîæèòåëüíàÿ ñûâîðîòêà êðîâè êóð ê
âèðóñó ÈÁÊ (ïîëîæèòåëüíûé êîíòðîëü), ðàçâåäåííàÿ 1:100,
ëèîôèëèçèðîâàííàÿ, 1,0 ñìÇ — 1 àìïóëà (ôëàêîí);
— Êîìïîíåíò N2 (Ê2) — îòðèöàòåëüíàÿ ñûâîðîòêà êðîâè êóð
(îòðèöàòåëüíûé êîíòðîëü), íå ñîäåðæàùàÿ àíòèòåë ê âèðóñó ÈÁÊ,
ðàçâåäåííàÿ 1:100, ëèîôèëèçèðîâàííàÿ, 1,0 ñì3 — 1 àìïóëà (ôëàêîí);
— Êîìïîíåíò N3 (Ê3) — î÷èùåííûé àíòèãåí âèðóñà ÈÁÊ,
àäñîðáèðîâàííûé ïî î,1 ñì3 â ëóíêàõ ïëàíøåòà äëÿ ÈÔÀ-2 ïëàíøåòà;
— Êîìïîíåíò N4 (Ê4) — àíòèâèäîâîé èììóíîïèðîêñèäàçíûé
êîíüþãàò ïðîòèâ èììóíîãëîáóëèíîâ êóð, ëèîôèëèçèðîâàííûé, 0,2 èëè
0,5 ñìÇ — 1 àìïóëà (ôëàêîí);
— Êîìïîíåíò N5 (Ê5.1,; Ê5.2.; Ê5.3.) — íàáîð ñîëåé äëÿ
ïðèãîòîâëåíèÿ áóôåðíîãî ðàñòâîðà; õëîðèä íàòðèÿ (NaCl) — 8,76 ã
— 1 ôëàêîí; íàòðèé ôîñôîðíîêèñëûé äâóçàìåøåííûé (Nà2 HPO4 õ 12
H2 O) — 3, 58 ã — 1 ôëàêîí; êàëèé ôîñôîðíîêèñëûé îäíîçàìåøåííûé
(ÊÍ2 ÐÎ4) — 1,36 ã — 1 ôëàêîí. Êàæäàÿ ñîëü ôàñóåòñÿ â îòäåëüíûé
ôëàêîí.
— Êîìïîíåíò N6 (Ê6) — äåòåðãåíò òâèí-20 èëè òðèòîí Õ-100,
0,5 ñì3 — 1 ïðîáèðêà,
— êîìïîíåíò N7 (Ê7) — 5-àìèíîñàëèöèëîâàÿ êèñëîòà, ïîðîøîê,
ïî 20 ìã — 2 ïðîáèðêè;
— Êîìïîíåíò N8 (Ê8) — ãèäðîïåðèò — 0,5 ã òàáëåòêà â óïàêîâêå — 1 øò.
1.3. Ïî âíåøíåìó âèäó ïîëîæèòåëüíàÿ è îòðèöàòåëüíàÿ
ñûâîðîòêè êðîâè êóð ïðåäñòàâëÿþò ñîáîé ñóõóþ ãîìîãåííóþ ïîðèñòóþ
ìàññó áåëîãî öâåòà, ðàñôàñîâàíû â àìïóëû (ôëàêîíû) ïîä âàêóóìîì
èëè ïîä èíåðòíûì ãàçîì — àçîòîì.
1.4. Íà àìïóëû èëè ôëàêîíû ñ èììóíîñïåöèôè÷åñêèìè
êîìïîíåíòàìè íàêëåèâàþò ýòèêåòêè ñ óêàçàíèåì íàèìåíîâàíèÿ
ïðåïàðàòà, îáúåìà â àìïóëå, ôëàêîíå èëè ïðîáèðêå â ñì3,
ðàáî÷åãî ðàçâåäåíèÿ, íîìåðà ñåðèè, íîìåðà êîíòðîëÿ, ñðîêà
ãîäíîñòè.
Íà ôëàêîíû, ïðîáèðêè äëÿ ìèêðîïðîá ñ íåñïåöèôè÷åñêèìè
êîìïîíåíòàìè íàêëåèâàþò ýòèêåòêè, íà êîòîðûõ óêàçûâàþò
íàèìåíîâàíèå êîìïîíåíòîâ, èõ êîëè÷åñòâî â ñì3 èëè ìã.
1.5. Àìïóëû è ôëàêîíû óïàêîâûâàþò â êàðòîííûå êîðîáêè ñ
íàëè÷èåì ãíåçä èëè ïåðåãîðîäîê, îáåñïå÷èâàþùèõ íåïîäâèæíîñòü
àìïóë è öåëîñòíîñòü ïðåïàðàòà.
Íà êàæäóþ êîðîáêó ñ íàáîðîì íàêëåèâàþò ýòèêåòêó, íà êîòîðîé
óêàçûâàþò íàèìåíîâàíèå ïðåäïðèÿòèÿ-èçãîòîâèòåëÿ è åãî òîâàðíûé
çíàê, ïîëíîå íàçâàíèå íàáîðà, íîìåð ñåðèè, íîìåð êîíòðîëÿ,
íàçâàíèå è êîëè÷åñòâî àìïóë (ôëàêîíîâ, ïðîáèðîê) êàæäîãî
êîìïîíåíòà, âõîäÿùåãî â íàáîð, îáúåì êîìïîíåíòà â îäíîé àìïóëå
(ôëàêîíå, ïðîáèðêå), äàòó èçãîòîâëåíèÿ (ìåñÿö, ãîä), ñðîê
ãîäíîñòè, óñëîâèÿ õðàíåíèÿ è îáîçíà÷åíèå ÒÓ.
2. ÏÎÐßÄÎÊ ÏÐÈÌÅÍÅÍÈß
2.1. Äëÿ èññëåäîâàíèÿ â ëàáîðàòîðèþ äîñòàâëÿþò ñûâîðîòêó
êðîâè êóð îò 20-25 ãîëîâ (ïî 0,2-0,3 ñì3) èç ïòèöåõîçÿéñòâ, ãäå
èìååòñÿ ïîäîçðåíèå íà äàííîå çàáîëåâàíèå. Ðåêîìåíäóåòñÿ
ïðîâîäèòü äîñòàâêó ïàðíûõ ïðîá ñûâîðîòêè êðîâè, âçÿòîé â íà÷àëå
çàáîëåâàíèÿ è ïîâòîðíî ÷åðåç 10-14 äíåé. Îòîáðàííûå ïðîáû õðàíÿò
â ìîðîçèëüíîé êàìåðå áûòîâîãî õîëîäèëüíèêà è äîñòàâëÿþò
îäíîâðåìåííî.
2.2. Äëÿ îïðåäåëåíèÿ íàïðÿæåííîñòè ïîñòâàêöèíàëüíîãî
èììóíèòåòà â ëàáîðàòîðèþ äîñòàâëÿþò ñûâîðîòêè êðîâè îò
âàêöèíèðîâàííîãî ïòèöåïîãîëîâüÿ ñïóñòÿ 3-4 íåäåëè ïîñëå
ïðèìåíåíèÿ âàêöèíû ïðîòèâ èíôåêöèîííîãî áðîíõèòà êóð.
3. ÏÎÄÃÎÒÎÂÊÀ ÊÎÍÏÎÍÅÍÒÎÂ ÍÀÁÎÐÀ È ÎÁÎÐÓÄÎÂÀÍÈß
ÄËß ÏÐÎÂÅÄÅÍÈß ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈÉ
3.1. Äëÿ ïîñòàíîâêè ÈÔÀ èñïîëüçóþò îäíî- è âîñüìèêàíàëüíûå
àâòîìàòè÷åñêèå ïèïåòêè ñî ñìåííûìè íàêîíå÷íèêàìè ðàçíûõ îáúåìîâ,
òåðìîñòàò ñ òåìïåðàòóðîé íàãðåâà 37+-0,5Ñ, áûòîâîé
õîëîäèëüíèê, PH-ìåòð (òèï 121 èëè 340), ïðîìûâàþùåå óñòðîéòâî
ðó÷íîå èëè ïîëóàâòîìàòè÷åñêîå, ñïåêòðîôîòîìåòð ñ âåðòèêàëüíûì
ëó÷îì èëè ïîëíûé êîìïëåêò îáîðóäîâàíèÿ äëÿ ÈÔÀ.
3.2. Ïåðåä ïðèãîòîâëåíèåì ðàáî÷èõ ðàñòâîðîâ íàáîð ñ
êîìïîíåíòàìè âûäåðæèâàþò 30 ìèí ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå
(18-20°Ñ).
Ïðèãîòîâëåíèå ðàñòâîðîâ
3.3. Ðàñòâîð N1 — 0,01 Ì ôîñôàòíî-áóôåðíûé ðàñòâîð ñ
0,15 Ì õëîðèäîì íàòðèÿ pH 7,2-7,4 è òâèíîì-20 èëè òðèòîíîì Õ-100
äî êîíå÷íîé êîíöåíòðàöèè 0,05%. Äëÿ åãî ïðèãîòîâëåíèÿ èç íàáîðà
áåðóò ôëàêîí ñ êîìïîíåíòîì 5,1 (õëîðèä íàòðèÿ), ñîäåðæèìîå
êîòîðîãî âíîñÿò â ìåðíóþ êîëáó íà 1000 ñì3, ðàñòâîðÿþò
äèñòèëëèðîâàííîé âîäîé è äîâîäÿò îáúåì äî ìåòêè, ïîëó÷àÿ 0,15 Ì
ðàñòâîð õëîðèäà íàòðèÿ. Çàòåì îòäåëüíî íà ôèçèîëîãè÷åñêîì
ðàñòâîðå (î,85%-íûé ðàñòâîð õëîðèäà íàòðèÿ) ãîòîâÿò ðàñòâîðû «À»,
«Á».
Ðàñòâîð «À». Èç íàáîðà áåðóò ôëàêîí ñ êîìïîíåíòîì 5.2.
(íàòðèé ôîñôîðíîêèñëûé äâóçàìåøåííûé), ñîäåðæèìîå êîòîðîãî âíîñÿò
â ìåðíóþ êîëáó âìåñòèìîñòüþ 100 ñì3 è ðàñòâîðÿþò ôèçèîëîãè÷åñêèì
ðàñòâîðîì. Äëÿ áûñòðîãî ðàñòâîðåíèÿ íàâåñêè ñîëè — ñîäåðæèìîãî
ìåðíîé êîëáû — ðåêîìåíäóåòñÿ ïîäîãðåòü è îáüåì äîâåñòè äî ìåòêè
ôèçèîëîãè÷åñêèì ðàñòâîðîì.
Ðàñòâîð «Á», ãîòîâÿò ïóòåì ðàñòâîðåíèÿ ñîäåðæèìîãî ôëàêîíà —
êîìïîíåíòà 5, 3. (êàëèé ôîñôîðíîêèñëûé îäíîçàìåøåííûé) â
ôèçèîëîãè÷åñêîì ðàñòâîðå è äîâîäÿò äî 100 ñì3 â ìåðíîé êîëáå.
Äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ î,01 Ì ôîñôàòíî-áóôåðíîãî ðàñòâîðà ñ
0,15 Ì õëîðèäîì íàòðèÿ pH 7,2-7,4 (ÔÁÐ) ïðîâîäÿò ñìåøèâàíèå
ðàñòâîðîâ «À» è «Á» â ìåðíîé êîëáå îáúåìîì 1000 ñì3 â
ñëåäóþùèõ ñîîòíîøåíèÿõ: ðàñòâîð «À» — 85,0 ñì3 ðàñòâîð «Á» —
28,0 ñì3 è äîâîäÿò äî ìåòêè çàðàíåå ïðèãîòîâëåííûì 0,15 Ì
ðàñòâîðîì õëîðèäà íàòðèÿ, çàòåì çàìåðÿþò çíà÷åíèå ðÍ, êîòîðîå
äîëæíî áûòü â ïðåäåëàõ 7,2-7,4. Åñëè pH íèæå óêàçàííîãî óðîâíÿ,
äîáàâëÿþò íåîáõîäèìîå êîëè÷åñòâî ðàñòâîðà «À», åñëè âûøå —
ðàñòâîðà «Á».
Ïîñëå ïðèãîòîâëåíèÿ ÔÁÐ pH 7,2-7,4 â ýòîò ðàñòâîð âíîñÿò
ñîäåðæèìîå ïðîáèðêè — êîìïîíåíò 6 (òâèí-20), ïîëó÷àÿ êîíå÷íóþ
êîíöåíòðàöèþ äåòåðãåíòà 0,05%.
Äàííûé ðàñòâîð èñïîëüçóþò äëÿ ðàçâåäåíèÿ ïîëîæèòåëüíîé,
îòðèöàòåëüíîé, èññëåäóåìûõ ïðîá ñûâîðîòêè êðîâè êóð,
àíòèâèäîâîãî êîíúþãàòà, ïðîìûâêè ëóíîê ïëàíøåòà. Õðàíÿò íå áîëåå
20 ñóòîê â áûòîâîì õîëîäèëüíèêå (òåìïåðàòóðà íå âûøå 4° Ñ).
3.4. Ðàñòâîð N2 — ñîäåðæèìîå àìïóëû — êîìïîíåíò 1
(ïîëîæèòåëüíàÿ ñûâîðîòêà êðîâè êóð) ðàñòâîðÿþò â 2,0 ñì3
ðàñòâîðà N1, ïîëó÷àþò ðàçâåäåíèå ïîëîæèòåëüíîé ñûâîðîòêè 1:200.
Ãîòîâÿò ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì. Äîïóñêàåòñÿ õðàíåíèå â ìîðîçèëüíîé
êàìåðå áûòîâîãî õîëîäèëüíèêà äî 15 ñóòîê.
3.5. Ðàñòâîð N3 — ñîäåðæèìîå àìïóëû — êîìïîíåíò 2 (îòðè-
öàòåëüíàÿ ñûâîðîòêà êðîâè êóð) ðàñòâîðÿþò â 2,0 ñì3 ðàñòâîðà
N1, ïîëó÷àþò ðàçâåäåíèå îòðèöàòåëüíîé ñûâîðîòêè 1:200. Ãîòîâÿò
ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì. Äîïóñêàåòñÿ õðàíåíèå â ìîðîçèëüíîé
êàìåðå áûòîâîãî õîëîäèëüíèêà äî 15 ñóòîê.
3.6. ðàñòâîð N4 — ñîäåðæèìîå àìïóëû — êîìïîíåíò 4 (àíòè-
âèäîâîé êîíúþãàò) ðàñòâîðÿþò â 21 ñì 3 ðàñòâîðà N 1. Ãîòîâÿò
ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì. Äîïóñêàåòñÿ õðàíåíèå â ìîðîçèëüíîé êàìåðå
áûòîâîãî õîëîäèëüíèêà äî 15 ñóòîê,
3.7. Ðàñòâîð N5 — òàáëåòêó ãèäðîïåðèòà (êîìïîíåíò 8)
ðàñòâîðÿþò â 15 ñì3 äèñòèëëèðîâàííîé âîäû, ðàñòâîð õðàíÿò â
çàùèùåííîì îò ñâåòà ìåñòå ïðè 4-8 C íå áîëåå 15 ñóòîê.
3.8. Ðàñòâîð N6 ñóáñòðàòíî-èíäèêàòîðíàÿ ñìåñü, ñîäåðæèìîå
ôëàêîíà — êîìïîíåíò 7 (5-àìèíîñàëèöèëîâàÿ êèñëîòà) ðàñòâîðÿ-
þò â êîëáå â 21 ñì3 ïîäîãðåòîé äî 50-60 Ñ äèñòèëëèðîâàííîé
âîäû, ïåðåìåøèâàþò äî ïîëíîãî ðàñòâîðåíèÿ è ïðîñâåòëåíèÿ
ðàñòâîðà è îõëàæäàþò äî êîìíàòíîé òåìïåðàòóðû (18-20 Ñ). Çàòåì
äîâîäÿò pH äî 6,0+0,2 C ïîìîùüþ 1%-íîãî ðàñòâîðà ãèäðîîêèñè
íàòðèÿ è â ñîäåðæèìîå êîëáû äîáàâëÿþò 0,1 ñì3 ðàñòâîðà N5
(ãèäðîïåðèò). Ãîòîâÿò íåïîñðåäñòâåííî ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì, íå
õðàíÿò.
4. ÏÐÎÂÅÄÅÍÈÅ ÈÌÌÍÓÍÎÔÅÐÌÅÍÒÍÎÃÎ ÀÍÀËÈÇÀ
4.1. Èç êîìïëåêòà íàáîðà áåðóò ïëàíøåò (êîìïîíåíò 3), â
ëóíêàõ êîòîðîãî àäñîðáèðîâàí î÷èùåííûé àíòèãåí âèðóñà èíôåêöèîí-
íîãî áðîíõèòà êóð è èñïîëüçóþò äëÿ ïîñòàíîâêè èììóíîôåðìåíòíîãî
àíàëèçà.
4.2. Ðàçâåäåíèå èñïûòóåìûõ ñûâîðîòîê.
Îáðàçöû èññëåäóåìûõ ïðîá ñûâîðîòîê êðîâè ðàçâîäÿò ðàñòâîðîì
N1. Ñ ýòîé öåëüþ ê 2,0 ñì3 óêàçàííîãî ðàñòâîðà äîáàâëÿþò 0,01
ñì3 ñûâîðîòêè êðîâè êóð, ïåðåìåøèâàþò è ïîëó÷àþò ðàçâåäåíèå
1:200.
4.3. Â òðè ëóíêè ïëàíøåòà âåðòèêàëüíîãî ðÿäà À1, B1, C1
âíîñÿò ïî 0,1 ñì3 ïîëîæèòåëüíîé ñûâîðîòêè êðîâè (ïîëîæèòåëüíûé
êîíòðîëü), à â òðè ñëåäóþùèå ëóíêè D1, Å1, F1 âíîñÿò ïî 0,1 ñì3
îòðèöàòåëüíîé ñûâîðîòêè êðîâè (îòðèöàòåëüíûé êîíòðîëü); ëóíêè
G1, H1 ñëóæàò äëÿ êîíòðîëÿ ðàñòâîðà êîíúþãàòà è
ñóáñòðàòíî-èíäèêàòîðíîé ñìåñè (ôîíîâûé êîíòðîëü), â êîòîðûå
âíîñÿò ïî 0,1 ñì3 ðàñòâîðà N 1.
4.4. Â îñòàëüíûå ëóíêè ïëàíøåòà ðÿäîâ Â2-Â12…Í2-H12
âíîñÿò ïî 0,1 ñì3 ðàñòâîðà N1, à â ëóíêè ãîðèçîíòàëüíîãî ðÿäà
À2-À12 — ïî 0,2 ñì3 èññëåäóåìûõ ïðîá ñûâîðîòêè êðîâè,
ïîäãîòîâëåííûõ ïî ï.4.2. è ïðîâîäÿò ðàñòèòðîâêó ïî âåðòèêàëüíûì
ðÿäàì, íà÷èíàÿ îò ðàçâåäåíèÿ 1:200 äî 1:25600. Ñ ýòîé öåëüþ èç
ëóíîê À2-À12 îòáèðàþò ïî 0,1 ñìÇ ðàçâåäåííûõ èññëåäóåìûõ
ñûâîðîòîê êðîâè è ïåðåíîñÿò â ëóíêè Â2-Â12 ñîîòâåòñòâóþùåãî
ðÿäà, ïèïåòèðóþò è ïðîâîäÿò äâóêðàòíûå ïîñëåäîâàòåëüíûå
ðàçâåäåíèÿ ïåðåíîñîì ïî 0,1 ñì3 â î÷åðåäíóþ ëóíêó âåðòèêàëüíîãî
ðÿäà, óäàëÿÿ èç ïîñëåäíèõ ëóíîê Í2-Í12 ïî î, 1 ñì3.
4.5. Ïëàíøåò îñòîðîæíî âñòðÿõèâàþò äëÿ ïåðåìåøèâàíèÿ
ñîäåðæèìîãî, çàêðûâàþò êðûøêîé è ïåðåíîñÿò â òåðìîñòàò
(37,0+0,5Ñ) íà 30 ìèí. Çàòåì ëóíêè ïëàíøåòà îñâîáîæäàþò îò
ñîäåðæèìîãî ïóòåì âûòðÿõèâàíèÿ, òðåõêðàòíî ïðîìûâàþò (ïî 3 ìèí)
ðàñòâîðîì N1 è ïîäñóøèâàþò (ïóòåì ïîñòóêèâàíèÿ ïëàíøåòîì ïî
ôèëüòðîâàëüíîé áóìàãå).
4.6. Ãîòîâÿò ðàñòâîð N4 ïî ï.3.6. è âíîñÿò âî âñå ëóíêè
ïëàíøåòà ïî 0,1 ñì3, çàòåì ïîìåùàþò â òåðìîñòàò íà 30 ìèí.
Ïîñëå ýòîãî ñîäåðæèìîå óäàëÿþò, ëóíêè òðåõêðàòíî ïðîìûâàþò,
óäàëÿþò ñîäåðæèìîå è ïîäñóøèâàþò ïóòåì ïîñòóêèâàíèÿ ïåðåâåðíóòûì
ïëàíøåòîì ïî ôèëüòðîâàëüíîé áóìàãå.
4.7. Ãîòîâÿò ðàñòâîð N6 ïî ï.3.6. âî âñå ëóíêè ïëàíøåòà
âíîñÿò ïî î,1 ñì3 ðàñòâîðà N6 — ñóáñòðàòíî-èíäèêàòîðíóþ ñìåñü
è îñòàâëÿþò ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå â òåìíîì ìåñòå íà 10-15 ìèí.
4.8. Âûÿâëåíèå ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë ìîæíî ïðîâîäèòü è áåç
ðàñòèòðîâêè èñïûòóåìûõ ñûâîðîòîê, â ýòîì ñëó÷àå âíà÷àëå ïðîâîäÿò
ðàñòèòðîâêó êîíòðîëüíûõ îáðàçöîâ ñûâîðîòîê: ïîëîæèòåëüíîé è
îòðèöàòåëüíîé.
Ïðåäâàðèòåëüíî â ëóíêè ïëàíøåòà îò Â11 è Â12 äî Í11 è Í12
âíîñÿò ïî 0,1 ñì3 ðàñòâîðà N1, à çàòåì â ëóíêè A11 è A12
âíîñÿò ïî 0,2 ñì3 ñîîòâåòñòâåííî ïîëîæèòåëüíîé è îòðèöàòåëüíîé
ñûâîðîòîê â ðàçâåäåíèÿ 1:200 è ïðîâîäÿò äâóêðàòíóþ ðàñòèòðîâêó
êîíòðîëüíûõ ñûâîðîòîê èç íàáîðà ïî âåðòèêàëüíûì ðÿäàì îò 1:200
äî 1:25600, óäàëÿÿ èç ïîñëåäíèõ ëóíîê ïî 0,1 ñì3 ñîäåðæèìîãî.
Äëÿ âèçóàëüíîãî è ñïåêòðîôîòîìåòðè÷åñêîãî ó÷åòà ðåçóëüòàòîâ
ðåàêöèè îáðàçöû èññëåäóåìûõ (èñïûòóåìûõ) ïðîá ñûâîðîòîê êðîâè
áåðóò â ðàçâåäåíèè 1:200 è âíîñÿò ïî 0,1 ñì3 â ñâîáîäíûå ëóíêè
ïëàíøåòà, èñïîëüçóÿ ïî îäíîé ëóíêå íà êàæäóþ ïðîáó.
Îñòàëüíûå ýòàïû ïîñòàíîâêè àíàëèçà ïðîâîäÿò àíàëîãè÷íî
ï.ï.4.6., 4.7., 4.8.
4.9. Ïðè ñïåêòðîôîòîìåòðè÷åñêîì ó÷åòå ðåçóëüòàòîâ àíàëèçà
âî âñå ëóíêè ïëàíøåòà äëÿ îñòàíîâêè ðåàêöèè íåîáõîäèìî âíåñòè ïî
0,05 ñì3 «ñòîï-ðåàãåíòà», ïðåäñòàâëÿþùåãî ñîáîé 0,5 Ì ðàñòâîð
ñåðíîé êèñëîòû (2 ñì3 H2 SO4 + 18,0 ñì3 äèñòèëëèðîâàííîé
âîäû).
5. Ó×ÅÒ ÐÅÇÓËÜÒÀÒΠÐÅÀÊÖÈÈ
5.1. Ó÷åò ðåçóëüòàòîâ àíàëèçà ïðîâîäÿò ÷åðåç 10-15 ìèí
îäíèì èç ñïîñîáîâ: âèçóàëüíî — ïî èíòåíñèâíîñòè îêðàøèâàíèÿ
ñîäåðæèìîãî ëóíîê ïëàíøåòà èëè èíñòðóìåíòàëüíî — ñ ïîìîùüþ
ñïåêòðîôîòîìåòðà ñ âåðòèêàëüíûì ëó÷îì ñâåòà ïóòåì èçìåðåíèÿ
îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè ïðè äëèíå âîëíû 450 íì.
5.2. Ïðè âèçóàëüíîé îöåíêå ðåçóëüòàòîâ ïåðâîíà÷àëüíî
ïðîâîäÿò ó÷åò ðåàêöèè ïî êîíòðîëüíûì ëóíêàì ïëàíøåòà: â ëóíêàõ ñ
ïîëîæèòåëüíîé ñûâîðîòêîé (ðÿä À11…Í11; ëóíêè À1, Â1, Ñ1)
îêðàøèâàíèå äîëæíî áûòü îò æåëòîâàòîãî äî òåìíî-êîðè÷íåâîãî
öâåòà. Ñ ðàçâåäåíèåì ïîëîæèòåëüíîé ñûâîðîòêè èíòåíñèâíîñòü
îêðàøèâàíèÿ óìåíüøàåòñÿ. Îêðàøèâàíèå ñîäåðæèìîãî ñ îòðèöàòåëüíîé
ñûâîðîòêîé è áåç ñûâîðîòêè (ôîíîâûé êîíòðîëü) äîëæíî
îòñóòñòâîâàòü èëè ñîäåðæèìîå ìîæåò èìåòü íåçíà÷èòåëüíóþ
æåëòîâàòóþ îêðàñêó (ðÿä À12…Í12; ëóíêè D1, Å1, F1, G1, H1).
Ðåàêöèÿ ó÷èòûâàåòñÿ ïðè ïðàâèëüíûõ ïîêàçàíèÿõ êîíòðîëåé. Ýòî
äàåò îñíîâàíèå ñ÷èòàòü, ÷òî êîìïîíåíòû íàáîðà ñîîòâåòñòâóþò
òðåáîâàíèÿì ÒÓ, è ìîæíî ïðèñòóïèòü ê ó÷åòó ðåàêöèè ñ ïðîáàìè
èñïûòóåìûõ ñûâîðîòîê.
5.3. Âèçóàëüíûé ó÷åò ðåçóëüòàòîâ îñíîâàí íà ñðàâíåíèè
èíòåíñèâíîñòè öâåòíîé îêðàñêè ñîäåðæèìîãî ëóíîê ïëàíøåòà
èñïûòóåìûõ ïðîá ñûâîðîòîê êðîâè ñ îêðàñêîé ëóíîê êîíòðîëüíîãî
ïîëîæèòåëüíîãî îáðàçöà (âåðòèêàëüíûé ðÿä À11…H11).
Èíòåíñèâíîñòü öâåòíîé ðåàêöèè ïðÿìîïðîïîðöèîíàëüíà êîëè÷åñòâó
àíòèòåë â èññëåäóåìûõ ïðîáàõ ñûâîðîòêè êðîâè. ×åì âûøå
èíòåíñèâíîñòü îêðàñêè ñîäåðæèìîãî ëóíîê (îò æåëòîâàòîãî äî
òåìíî-êîðè÷íåâîãî), òåì âûøå òèòð àíòèòåë â èññëåäóåìûõ ïðîáàõ.
5.4. Ïðè ïîñòàíîâêå ðåàêöèè áåç ðàñòèòðîâêè èñïûòóåìûõ ïðîá
òèòð ñûâîðîòêè îïðåäåëÿþò ïî èíòåíñèâíîñòè îêðàøèâàíèÿ
èñïûòóåìûõ ñûâîðîòîê â ñðàâíåíèè ñ èíòåíñèâíîñòüþ îêðàøèâàíèÿ
ðàçëè÷íûõ ðàçâåäåíèé ïîëîæèòåëüíîé êîíòðîëüíîé ñûâîðîòêè (ðÿä
À11…Í11), êîòîðàÿ ÿâëÿåòñÿ êàê áû ýòàëîííîé øêàëîé äëÿ îöåíêè
ðåçóëüòàòîâ.
 ñëó÷àå íåîáõîäèìîñòè òî÷íîãî îïðåäåëåíèÿ òèòðà ñûâîðîòêè
åå ðàñòèòðîâûâàþò êàê óêàçàíî â ï.4.4.
5.5. Ðàñòèòðîâêà ïðîá èñïûòóåìûõ ñûâîðîòîê êðîâè äàåò
âîçìîæíîñòü êîëè÷åñòâåííî îöåíèâàòü òèòð ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë.
Çà òèòð èñïûòóåìîé ñûâîðîòêè êðîâè ïðèíèìàþò åå ïîñëåäíåå
ðàçâåäåíèå, ïðè êîòîðîì íàáëþäàþò âèäèìîå ãëàçîì öâåòíîå
îêðàøèâàíèå ñîäåðæèìîãî ëóíîê, áîëåå èíòåíñèâíîå ïî ñðàâíåíèþ ñ
îêðàøèâàíèåì ñûâîðîòîê îòðèöàòåëüíîãî êîíòðîëÿ. Ïîëîæèòåëüíûìè
ñ÷èòàþòñÿ ïðîáû ñûâîðîòîê, èìåþùèå îêðàñêó ðàçíîé ñòåïåíè
èíòåíñèâíîñòè, ñîäåðæèìîå ëóíîê êîòîðûõ ñðàâíèìî ñ îêðàñêîé
ïîëîæèòåëüíîé êîíòðîëüíîé ñûâîðîòêè (ëóíêè ïëàíøåòà À11…Í11).
Îòðèöàòåëüíûìè ñ÷èòàþòñÿ ïðîáû ñûâîðîòîê, íå èçìåíèâøèõ
îêðàñêó èëè èìåþùèõ íåçíà÷èòåëüíîå æåëòîâàòîå îêðàøèâàíèå
ñîäåðæèìîãî ëóíîê, ñðàâíèìîå ñ îêðàøèâàíèåì îòðèöàòåëüíîé
êîíòðîëüíîé ñûâîðîòêè (ëóíêè ïëàíøåòà À12…Í12).
5.6. Èíñòðóìåíòàëüíûé — ñïåêòðîôîòîìåòðè÷åñêèé ó÷åò
ðåçóëüòàòîâ àíàëèçà ïîçâîëÿåò êîëè÷åñòâåííî îöåíèòü òèòðû
ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë â èññëåäóåìûõ ïðîáàõ ïóòåì èçìåðåíèé
îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè (ÎÏ) ïðè äëèíå âîëíû 450 íì ñ îäíîâðåìåííîé
çàïèñüþ ðåçóëüòàòîâ ñ êàæäîé ëóíêè ïëàíøåòà íà ëèñòå áóìàãè èëè
ñïåöèàëüíîé áóìàæíîé ëåíòå.
5.7. Ïðè ñïåêòðîôîòîìåòðè÷åñêîì ó÷åòå ðåçóëüòàòû îïòè÷åñêîé
ïëîòíîñòè âûðàæàþò â îïòè÷åñêèõ åäèíèöàõ.
Î ðåçóëüòàòàõ ðåàêöèè ñóäÿò ïî êîýôôèöèåíòó ñîîòíîøåíèé
ìåæäó ïîêàçàíèÿìè îïòè÷åñêèõ ïëîòíîñòåé èññëåäóåìûõ ïðîá
ñûâîðîòîê è òàêîâûì êîíòðîëüíîãî îáðàçöà.
Äëÿ ïîëîæèòåëüíîé ðåàêöèè êîýôôèöèåíò ñîîòíîøåíèé äîëæåí
ïðåâûøàòü áîëåå ÷åì â 2,1 ðàçà îïòè÷åñêóþ ïëîòíîñòü
îòðèöàòåëüíîãî êîíòðîëÿ ÷òî ñâèäåòåëüñòâóåò î âûÿâëåíèè
ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë ê âèðóñó ÈÁÊ â èññëåäóåìîé ïðîáå.
Äëÿ îòðèöàòåëüíîé ðåàêöèè êîýôôèöèåíò ñîîòíîøåíèé ìåæäó
ïîêàçàíèÿìè îïòè÷åñêèõ ïëîòíîñòåé äîëæåí áûòü ìåíüøå 2,0, ÷òî
ñâèäåòåëüñòâóåò îá îòñóòñòâèè ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë â
èññëåäóåìîé ïðîáå ñûâîðîòêè.
Åñëè êîýôôèöèåíò ñîîòíîøåíèé îïòè÷åñêèõ ïëîòíîñòåé ðàâåí
2,0, òî ðåàêöèÿ îöåíèâàåòñÿ êàê ñîìíèòåëüíàÿ, à èñïûòóåìàÿ ïðîáà
ñûâîðîòêè êðîâè ïîäëåæèò ïîâòîðíîìó èññëåäîâàíèþ è ïðè
ïîäòâåðæäåíèè ïåðâîíà÷àëüíîãî ðåçóëüòàòà ñ÷èòàåòñÿ ïîëîæèòåëüíîé.
6. ÎÖÅÍÊÀ ÐÅÇÓËÜÒÀÒÎÂ ÐÅÀÊÖÈÈ
6.1. Îáíàðóæåíèå ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë â èññëåäóåìûõ ïðîáàõ
ñûâîðîòîê â òèòðå îò 1:200 è âûøå ó 50 è áîëåå ïðîöåíòîâ
ïòèöåïîãîëîâüÿ, ãäå íå ïðîâîäèòñÿ ñïåöèôè÷åñêàÿ ïðîôèëàêòèêà
ïðîòèâ ÈÁÊ, ÿâëÿåòñÿ äèàãíîñòè÷åñêè ïîëîæèòåëüíûì òèòðîì è
ñâèäåòåëüñòâóåò î íåáëàãîïîëó÷èè è ïåðñèñòåíöèè ïîëåâîãî âèðóñà
ÈÁÊ â ïòèöåõîçÿéñòâå.  ýòîì ñëó÷àå ïîëîæèòåëüíûå ñûâîðîòêè
ðàñòèòðîâûâàþò è ïðè âûÿâëåíèè òèòðîâ àíòèòåë 1:800 è âûøå
ïðîâîäÿò âûäåëåíèå âèðóñà ÈÁÊ è ïîñòàíîâêó áèîïðîáû.
6.2. Ïðè èññëåäîâàíèè «ïàðíûõ» ïðîá ñûâîðîòîê êðîâè è
îáíàðóæåíèè íàðàñòàíèÿ òèòðà ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë â ÷åòûðå è
áîëåå ðàç íå ìåíåå, ÷åì ó 50% èññëåäóåìûõ ïðîá äàåò îñíîâàíèå
äëÿ ïîñòàíîêè äèàãíîçà íà èíôåêöèîííûé áðîíõèò êóð.
Îáíàðóæåíèå íàðàñòàíèÿ òèòðà àíòèòåë â èññëåäóåìûõ ïðîáàõ,
íå äîñòèãàþùåãî ÷åòûðåõêðàòíîãî óâåëè÷åíèÿ, èëè âûÿâëåíèå
íàðàñòàíèÿ òèòðà ìåíåå, ÷åì â 50% èñïûòóåìûõ ïðîá ñûâîðîòîê
êðîâè, ñëóæàò îñíîâàíèåì äëÿ ïðîâåäåíèÿ äîïîëíèòåëüíûõ
âèðóñîëîãè÷åñêèõ èññëåäîâàíèé.
6.3. Ïðè èñïîëüçîâàíèè íàáîðà äëÿ êîíòðîëÿ íàïðÿæåííîñòè
ïîñòâàêöèíàëüíîãî èììóíèòåòà èññëåäóþò ñûâîðîòêè êðîâè ÷åðåç ç-4
íåäåëè ïîñëå ïðèìåíåíèÿ âàêöèíû. Ïðè ýòîì óðîâåíü
ïîñòâàêöèíàëüíûõ àíòèòåë äîëæåí áûòü íå íèæå 1:400 áîëåå ÷åì â
80% èññëåäóåìûõ ïðîá ñûâîðîòîê.
Ìåòîäè÷åñêèå óêàçàíèÿ ðàçðàáîòàíû âåäóùèì íàó÷íûì ñîòðóäíè-
êîì îòäåëà âèðóñîëîãèè ÂÍÈÂÈÏ, êàíäèäàòîì âåòåðèíàðíûõ íàóê, îò-
âåòñòâåííûì ðàçðàáîò÷èêîì Ñåðãååâûì Â.Ä.
Источник
