Набор для выявления антител к вирусу инфекционного бронхита кур
Âíèìàíèå! Ýòîò ñïðàâî÷íèê äîñòóïåí íà CD. Ïîäðîáíàÿ èíôîðìàöèÿ îáî âñåõ ïðåïàðàòàõ, óäîáíûé ïîèñê, àâòîìàòè÷åñêîå îáíîâëåíèå êàòàëîãà. Ïîäðîáíåå »»
Àëôàâèòíûé óêàçàòåëü
| Ïðåïàðàòû ïî ïðîèçâîäèòåëÿì
| Ïðåïàðàòû ïî çàáîëåâàíèÿì
| Ïîèñê
Íàçâàíèå
ÍÀÁÎÐ ÄËß ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈß ÀÍÒÈÒÅË Ê ÂÈÐÓÑÓ ÈÍÔÅÊÖÈÎÍÍÎÃÎ ÁÐÎÍÕÈÒÀ ÊÓÐ (ÈÁÊ) ÈÌÌÓÍÎÔÅÐÌÅÍÒÍÛÌ ÌÅÒÎÄÎÌ ÏÐÈ ÒÅÑÒÈÐÎÂÀÍÈÈ ÑÛÂÎÐÎÒÎÊ Â ÎÄÍÎÌ ÐÀÇÂÅÄÅÍÈÈ
Ñîñòàâ è ôîðìà âûïóñêà
 ñîñòàâ íàáîðà âõîäÿò — Èììóíîñïåöèôè÷åñêèå êîìïîíåíòû: î÷èùåííûé àíòèãåí âèðóñà ÈÁÊ, àäñîðáèðîâàííûé â ëóíêàõ ïëàíøåòà äëÿ ÈÔÀ 2 ïëàíøåòà; ãèïåðèììóííàÿ ñûâîðîòêà êðîâè êóð ê âèðóñó ÈÁÊ (ïîëîæèòåëüíûé êîíòðîëü), öåëüíàÿ ëèîôèëèçèðîâàííàÿ — ñóõàÿ ïîðèñòàÿ ìàññà áåëîãî èëè ñâåòëî-æåëòîãî öâåòà, 0,5 ìë — 1 ôëàêîí, èëè íàòèâíàÿ — ïðîçðà÷íàÿ æèäêîñòü æåëòîãî èëè êðàñíîãî öâåòà, 0,2 ìë — 1 ôëàêîí; íîðìàëüíàÿ ñûâîðîòêà êðîâè êóð (îòðèöàòåëüíûé êîíòðîëü), íå ñîäåðæàùàÿ àíòèòåë ê âèðóñó ÈÁÊ, öåëüíàÿ ëèîôèëèçèðîâàííàÿ — ñóõàÿ ïîðèñòàÿ ìàññà áåëîãî èëè ñâåòëî-æåëòîãî öâåòà, 0,5 ìë — 1 ôëàêîí, èëè íàòèâíàÿ — ïðîçðà÷íàÿ æèäêîñòü æåëòîãî èëè êðàñíîãî öâåòà, 0,2 ìë — 1 ôëàêîí; àíòèâèäîâîé èììóíîïåðîêñèäàçíûé êîíúþãàò ïðîòèâ lgG êóð, ëèîôèëèçèðîâàííûé, ñóõàÿ ïîðèñòàÿ ìàññà áåëîãî öâåòà, 0,5 ìë — 1 ôëàêîí, èëè êîíöåíòðàò ðàñòâîðà, ïðîçðà÷íàÿ áåñöâåòíàÿ æèäêîñòü, 3,0 ìë — 1 ôëàêîí, ðàáî÷åå ðàçâåäåíèå 1 : (óêàçûâàåòñÿ äëÿ êàæäîé ñåðèè). Íåñïåöèôè÷åñêèå êîìïîíåíòû: êîíöåíòðàò áóôåðíîãî ðàñòâîðà äëÿ ðàçâåäåíèÿ èñïûòóåìûõ è êîíòðîëüíûõ ïðîá, àíòèâèäîâîãî êîíúþãàòà, áåñöâåòíàÿ ïðîçðà÷íàÿ æèäêîñòü, 32,5 ìë — 1 ôëàêîí; êîíöåíòðàò ðàñòâîðà äëÿ ìåæýòàïíîé ïðîìûâêè, áåñöâåòíàÿ ïðîçðà÷íàÿ æèäêîñòü, 130 ìë — 1 ôëàêîí; ðàñòâîð ñóáñòðàòà ÀÁÒÑ (2,2′-àçèíî-äè[3-ýòèë]áåíçòèàçîëèíñóëüôîíîâàÿ êèñëîòà) ñ ïåðåêèñüþ âîäîðîäà — çåëåíîâàòàÿ ïðîçðà÷íàÿ æèäêîñòü, 25 ìë — 1 ôëàêîí; êîíöåíòðèðîâàííûé 5 êðàòíûé — 5 % ðàñòâîð äîäåöèëñóëüôàòà íàòðèÿ, áåñöâåòíàÿ ïðîçðà÷íàÿ æèäêîñòü, 5,0 ìë — 1 ôëàêîí. Äîïóñêàåòñÿ îáðàçîâàíèå îñàäêà áåëîãî öâåòà ïðè õðàíåíèè â õîëîäèëüíèêå. Íàáîð ðàññ÷èòàí íà àíàëèç 92 ïðîá ñûâîðîòîê êðîâè êóð íà êàæäîì ïëàíøåòå. Êîìïîíîâêà íàáîðà äîïóñêàåò âîçìîæíîñòü äðîáíîãî èñïîëüçîâàíèÿ êîìïîíåíòîâ äëÿ ïðîâåäåíèÿ èññëåäîâàíèé ïî ìåðå ïîñòóïëåíèÿ áèîëîãè÷åñêîãî ìàòåðèàëà.
Ôàðìàêîëîãè÷åñêèå ñâîéñòâà
Ñóùíîñòü ìåòîäà çàêëþ÷àåòñÿ â âûÿâëåíèè êîìïëåêñà àíòèãåí àíòèòåëî, îáðàçîâàâøåãîñÿ íà ïîâåðõíîñòè ëóíîê ïîëèñòèðîëîâîãî ïëàíøåòà. Ñïåöèôè÷åñêèé êîìïëåêñ âçàèìîäåéñòâóåò ñ àíòèâèäîâûì èììóíîëåðîêñèäàçíûì êîíúþãàòîì ïðîòèâ lgG êóð è âûçûâàåò ðàçëîæåíèå ñóáñòðàòà, îêðàøèâàÿ ñîäåðæèìîå ëóíîê ïëàíøåòà. Èíòåíñèâíîñòü îêðàñêè ïðÿìî ïðîïîðöèîíàëüíà êîíöåíòðàöèè àíòèòåë â èññëåäóåìîì ìàòåðèàëå.
Ïîêàçàíèÿ
Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñïåöèôè÷åñêèõ ãóìîðàëüíûõ àíòèòåë ïðîòèâ âèðóñà èíôåêöèîííîãî áðîíõèòà êóð (ÈÁÊ) â ñûâîðîòêàõ êðîâè êóð èììóíîôåðìåíòíûì ìåòîäîì (ÈÔÀ) ïðè èññëåäîâàíèè â îäíîì ðàçâåäåíèè.
Äîçû è ñïîñîá ïðèìåíåíèÿ
Äëÿ ïîñòàíîâêè ðåàêöèè èñïîëüçóþò: îäíî- è âîñüìèêàíàëüíûå àâòîìàòè÷åñêèå ïèïåòêè ïåðåìåííîãî îáúåìà äî 0,02 ìë äî 0,2 ìë è äî 1,0 ìë ñî ñìåííûìè íàêîíå÷íèêàìè, ìåðíóþ ëàáîðàòîðíóþ ïîñóäó, ïðîáèðêè äëÿ ðàçâåäåíèÿ ïðîá, äèñòèëëèðîâàííóþ èëè äåèîíèçèðîâàííóþ âîäó, òåðìîñòàò ñ òåìïåðàòóðîé íàãðåâà (37 + 0,5 °Ñ), áûòîâîé õîëîäèëüíèê, ñïåêòðîôîòîìåòð (ðèäåð) ëþáîé ìîäåëè ñ ôèëüòðîì íà 405 — 410 íì äëÿ ó÷åòîâ ðåçóëüòàòîâ ÈÔÀ. Ïåðåä íà÷àëîì ðàáîòû íàáîð ñ êîìïîíåíòàìè âûäåðæèâàþò 30 ìèíóò ïðè òåìïåðàòóðå 18 — 22 °Ñ. Áóôåð äëÿ ðàçâåäåíèÿ ïðîá, êîíòðîëüíûõ ñûâîðîòîê, àíòèêóðèíîãî êîíúþãàòà. Ñîäåðæèìîå ôëàêîíà ñ êîíöåíòðàòîì áóôåðà äëÿ ðàçâåäåíèÿ äîâîäÿò äèñòèëëèðîâàííîé âîäîé äî 250 ìë. Ðàáî÷èé ðàñòâîð êîíúþãàòà. Ñîäåðæèìîå ôëàêîíà ñ ëèîôèëèçèðîâàííûì êîíúþãàòîì ðàñòâîðÿþò â 0,5 ìë áóôåðà äëÿ ðàçâåäåíèÿ ïðîá. Äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ ðàáî÷åãî ðàçâåäåíèÿ êîíúþãàòà __ ìë êîíöåíòðàòà êîíúþãàòà äîâîäÿò áóôåðîì äëÿ ðàçâåäåíèÿ äî 10 ìë (â ðàñ÷åòå íà 1 ïëàíøåò). Ñîäåðæèìîå ôëàêîíà ñ ëèîôèëèçèðîâàííîé ïîëîæèòåëüíîé êîíòðîëüíîé ñûâîðîòêîé êðîâè êóð ðàñòâîðÿþò â 0,5 ìë áóôåðà äëÿ ðàçâåäåíèÿ ïðîá. Ãîòîâÿò ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì. Ñûâîðîòêè â íàòèâíîì âèäå ãîòîâû ê èñïîëüçîâàíèþ. Ñîäåðæèìîå ôëàêîíà ñ ëèîôèëèçèðîâàííîé îòðèöàòåëüíîé ñûâîðîòêîé êðîâè êóð ðàñòâîðÿþò â 0,5 ìë áóôåðà äëÿ ðàçâåäåíèÿ ïðîá. Ãîòîâÿò ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì. Ñûâîðîòêè â íàòèâíîì âèäå ãîòîâû ê èñïîëüçîâàíèþ. Ïðîìûâî÷íûé áóôåð. Ñîäåðæèìîå ôëàêîíà ñ êîíöåíòðàòîì áóôåðà äëÿ îòìûâêè äîâîäÿò äèñòèëëèðîâàííîé èëè äåèîíèçèðîâàííîé âîäîé äî 1000 ìë è òùàòåëüíî ïåðåìåøèâàþò. . Êîíöåíòðèðîâàííûé ðàçâîäÿò â 5 ðàç äèñòèëëèðîâàííîé èëè äåèîíèçèðîâàííîé âîäîé è òùàòåëüíî ïåðåìåøèâàþò (íàïðèìåð äëÿ ïîëó÷åíèÿ 12,5 ìë ê 2,5 ìë êîíöåíòðàòà äîáàâëÿþò 10 ìë âîäû). Ðàñõîä íà 1 ïëàíøåòó — 12,5 ìë. Âíèìàíèå! Åñëè ïðè õðàíåíèè 5 êðàòíîãî ðàñòâîðà îáðàçîâàëñÿ îñàäîê, åãî íåîáõîäèìî ïðîãðåòü ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå èëè ïðè òåìïåðàòóðå 37 °Ñ äî ïîëíîãî ðàñòâîðåíèÿ îñàäêà. Ðàçâåäåíèå èñïûòóåìûõ è êîíòðîëüíûõ ñûâîðîòîê. Âñå èñïûòóåìûå è êîíòðîëüíûå ïðîáû ñûâîðîòîê ðàçâîäÿò 1 : 400 áóôåðîì äëÿ ðàçâåäåíèÿ, èñïîëüçóÿ äëÿ êàæäîé ïðîáû íîâûé íàêîíå÷íèê. Ñ ýòîé öåëüþ ê 0,0025 ìë ñûâîðîòêè êðîâè êóð äîáàâëÿþò 1 ìë áóôåðà äëÿ ðàçâåäåíèÿ è òðèæäû ïèïåòèðóþò. Ïîñòàíîâêà ðåàêöèè. Èç êîìïëåêòà íàáîðà áåðóò ïëàíøåò, ñåíñèáèëèçèðîâàííûé àíòèãåíîì âèðóñà ÈÁÊ.  ëóíêè À1 — À2 âíîñÿò ïî 100 ìêë ïîäãîòîâëåííîãî îòðèöàòåëüíîãî êîíòðîëÿ.  ëóíêè À3 — À4 âíîñÿò ïî 100 ìêë ïîäãîòîâëåííîãî ïîëîæèòåëüíîãî êîíòðîëÿ.  îñòàëüíûå ëóíêè ïëàíøåòà âíîñÿò ïî 100 ìêë èñïûòóåìûõ ïðîá ñûâîðîòêè êðîâè. Ïëàíøåò íàêðûâàþò êðûøêîé è âûäåðæèâàþò 30 ìèíóò ïðè òåìïåðàòóðå 37 °Ñ, ïîñëå ÷åãî ëóíêè îñâîáîæäàþò îò ñîäåðæèìîãî ðåçêèì âñòðÿõèâàíèåì è òðèæäû ïðîìûâàþò ïðîìûâî÷íûì áóôåðîì (ïî 300 ìêë íà ëóíêó). Çàòåì æèäêîñòü îêîí÷àòåëüíî óäàëÿþò è ïëàíøåò ïîäñóøèâàþò ïîñòóêèâàíèåì ïî ñëîæåííîé â íåñêîëüêî ñëîåâ ôèëüòðîâàëüíîé áóìàãå. Âî âñå èñïîëüçóåìûå ëóíêè ïëàíøåòà âíîñÿò ïî 100 ìêë ðàáî÷åãî ðàñòâîðà êîíúþãàòà, íàêðûâàþò êðûøêîé è âûäåðæèâàþò 30 ìèíóò ïðè òåìïåðàòóðå 37 °Ñ. Òðèæäû ïîâòîðÿþò ïðîöåäóðó ïðîìûâàíèÿ. Âî âñå èñïîëüçóåìûå ëóíêè ïëàíøåòà âíîñÿò ïî 100 ìêë ðàñòâîðà ñóáñòðàòà, íàêðûâàþò êðûøêîé è âûäåðæèâàþò 10 ìèíóò ïðè òåìïåðàòóðå 22 — 28 °Ñ. Ðåàêöèþ îñòàíàâëèâàþò äîáàâëåíèåì â êàæäóþ èñïîëüçóåìóþ ëóíêó ïî 100 ìêë ïîäãîòîâëåííîãî . Ó÷åò ðåçóëüòàòîâ àíàëèçà ïðîâîäÿò èíñòðóìåíòàëüíûì ñïîñîáîì ñðàçó æå ïîñëå îñòàíîâêè ðåàêöèè, èñïîëüçóÿ ñïåêòðîôîòîìåòð (ðèäåð) ñ âåðòèêàëüíûì ëó÷îì ñâåòà ïðè äëèíå âîëíû 405 — 410 íì. Îöåíêà ðåçóëüòàòîâ ðåàêöèè: Ðåàêöèþ îöåíèâàþò ïî îòíîøåíèþ çíà÷åíèé îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè (ÎÏ) èñïûòóåìîé ïðîáû (S) ê çíà÷åíèþ îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè ïîëîæèòåëüíîãî êîíòðîëÿ (Ð), ÷òî îòðàæàåò îòíîñèòåëüíîå êîëè÷åñòâî àíòèòåë â èññëåäóåìûõ îáðàçöàõ. Ñðåäíåå çíà÷åíèå ÎÏ îòðèöàòåëüíûõ êîíòðîëåé äîëæíî áûòü íå âûøå 0,150. Ðàçíèöà ïîêàçàòåëåé ìåæäó ñðåäíèì çíà÷åíèåì ÎÏ ïîëîæèòåëüíîãî êîíòðîëÿ è ñðåäíèì çíà÷åíèåì îòðèöàòåëüíîãî êîíòðîëÿ äîïóñòèìà â äèàïàçîíå 0,350 — 0,800. Åñëè ïîëó÷åííûå çíà÷åíèÿ âûõîäÿò çà ïðåäåëû ýòèõ çíà÷åíèé, ðåçóëüòàòû ñ÷èòàþòñÿ íåäîñòîâåðíûìè è ðåàêöèþ ïîâòîðÿþò. Ðàñ÷åò S/Ð îòíîøåíèÿ:
S/P = (Çíà÷åíèå ÎÏ èñïûò. ñûâ-êè — ñð. çíà÷åíèå ÎÏ îòðèöàòåëüíîãî êîíòðîëÿ) / (Ñð. çíà÷åíèå ïîëîæ. êîíòðîëÿ — ñð. çíà÷åíèå îòðèöàòåëüíîãî êîíòðîëÿ)
Ïîëó÷åííûå çíà÷åíèÿ S/Ð ïîçâîëÿþò äèôôåðåíöèðîâàòü èñïûòóåìûå ñûâîðîòêè íà ïîëîæèòåëüíûå, îòðèöàòåëüíûå è ñîìíèòåëüíûå. Ïðîáû ñûâîðîòîê ñî çíà÷åíèÿìè S/Ð íèæå èëè ðàâíûìè 0,132 ñ÷èòàþòñÿ îòðèöàòåëüíûìè, åñëè áîëüøå 0,221 — ïîëîæèòåëüíûìè. Ðàñ÷åò òèòðà àíòèòåë. Òèòð àíòèòåë â èññëåäóåìûõ ïðîáàõ ñûâîðîòêè êðîâè, ðàçâåäåííûõ 1 : 400, âû÷èñëÿþò ïî ñëåäóþùåé ôîðìóëå: Òèòð = àïtilg (1,4727 (lg S/Ð) + 3,8372). Èíòåðïðåòàöèÿ ðåçóëüòàòîâ — ïî ðåçóëüòàòàì ÈÔÀ îïðåäåëÿþò íàïðÿæåííîñòü èììóíèòåòà â ïàðòèè ïðèâèòûõ öûïëÿò ïóòåì äåëåíèÿ êîëè÷åñòâà ïîëîæèòåëüíûõ ïðîá ê îáùåìó êîëè÷åñòâó èññëåäîâàííûõ ñûâîðîòîê è âûðàæàþò â ïðîöåíòàõ. Ïòèöó ñ÷èòàþò èììóííîé ê èíôåêöèîííîìó áðîíõèòó êóð ïðè íàïðÿæåííîñòè èììóíèòåòà 80 è áîëåå ïðîöåíòîâ (ò. å., åñëè â 80 è áîëåå ïðîöåíòàõ èññëåäîâàííûõ ïðîá ñûâîðîòîê êðîâè ïîëó÷åíû ïîëîæèòåëüíûå ðåçóëüòàòû). Ïòèöó âàêöèíèðóþò (ðåâàêöèíèðóþò) ïðè íàïðÿæåííîñòè èììóíèòåòà ìåíåå 80 %. Îáíàðóæåíèå àíòèòåë ó íåâàêöèíèðîâàííîé ïòèöû ñâèäåòåëüñòâóåò î âîçìîæíîé öèðêóëÿöèè â ñòàäå ïîëåâîãî âèðóñà ÈÁÊ.  òàêèõ ñëó÷àÿõ ÷åðåç 21 — 30 äíåé ïðîâîäÿò ïîâòîðíîå èññëåäîâàíèå ïðîá ñûâîðîòîê êðîâè, ïîëó÷åííûõ îò ýòèõ æå ïòèö. Íàðàñòàíèå òèòðîâ è (èëè) óâåëè÷åíèå êîëè÷åñòâà ïòèö ñ âûñîêèì óðîâíåì àíòèòåë ïðè íàëè÷èè êëèíè÷åñêèõ è ïàòîëîãîàíàòîìè÷åñêèõ ïðèçíàêîâ ÈÁÊ ÿâëÿåòñÿ îñíîâàíèåì äëÿ îáúÿâëåíèÿ â õîçÿéñòâå íåáëàãî
ïîëó÷èÿ ïî äàííîìó çàáîëåâàíèþ.
Îñîáûå óêàçàíèÿ
Ôëàêîíû è ïëàíøåòû áåç ýòèêåòîê, ñ íàðóøåíèåì öåëîñòíîñòè, èçìåíåíèåì êîíñèñòåíöèè èëè öâåòà, íàëè÷èåì ïîñòîðîííèõ ïðèìåñåé ïîäëåæàò âûáðàêîâêå è óòèëèçàöèè. Ðàáîòó ñ õèìè÷åñêèìè êîìïîíåíòàìè íàáîðà ñëåäóåò ïðîâîäèòü î÷åíü îñòîðîæíî. Ïðè ïîïàäàíèè èõ íà êîæó èëè ñëèçèñòûå îáîëî÷êè ðåêîìåíäóåòñÿ ïðîìûâàòü ïîðàæåííîå ìåñòî áîëüøèì êîëè÷åñòâîì âîäîïðîâîäíîé âîäû ïîä êðàíîì. Èñïîëüçîâàííûå ïëàíøåòû îáåççàðàæèâàþò 3 % ðàñòâîðîì õëîðíîé èçâåñòè èëè äðóãèìè ñèëüíûìè îêèñëèòåëÿìè. Çàïðåùàåòñÿ ïðèåì ïèùè è âîäû, êóðåíèå â ïîìåùåíèè, ãäå ïðîâîäÿòñÿ ðàáîòû ñ êîìïîíåíòàìè íàáîðà.
Óñëîâèÿ õðàíåíèÿ
 çàùèùåííîì îò ñâåòà ìåñòå è òåìïåðàòóðå îò 2 äî 8 °Ñ. Íå äîïóñêàåòñÿ çàìîðàæèâàíèå êîìïîíåíòîâ. Ñðîê ãîäíîñòè íàáîðà — 12 ìåñÿöåâ.
ÏðîèçâîäèòåëüÔåäåðàëüíûé öåíòð îõðàíû çäîðîâüÿ æèâîòíûõ ÔÃÓ (ÂÍÈÈÇÆ ÔÃÓ), Ðîññèÿ
ÍÀÁÎÐ ÄËß ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈß ÀÍÒÈÒÅË Ê ÂÈÐÓÑÓ ÈÍÔÅÊÖÈÎÍÍÎÃÎ ÁÐÎÍÕÈÒÀ ÊÓÐ (ÈÁÊ) ÈÌÌÓÍÎÔÅÐÌÅÍÒÍÛÌ ÌÅÒÎÄÎÌ ÏÐÈ ÒÅÑÒÈÐÎÂÀÍÈÈ ÑÛÂÎÐÎÒÎÊ Â ÎÄÍÎÌ ÐÀÇÂÅÄÅÍÈÈ
Ñîñòàâ è ôîðìà âûïóñêà
 ñîñòàâ íàáîðà âõîäÿò — Èììóíîñïåöèôè÷åñêèå êîìïîíåíòû: î÷èùåííûé àíòèãåí âèðóñà ÈÁÊ, àäñîðáèðîâàííûé â ëóíêàõ ïëàíøåòà äëÿ ÈÔÀ 2 ïëàíøåòà; ãèïåðèììóííàÿ ñûâîðîòêà êðîâè êóð ê âèðóñó ÈÁÊ (ïîëîæèòåëüíûé êîíòðîëü), öåëüíàÿ ëèîôèëèçèðîâàííàÿ — ñóõàÿ ïîðèñòàÿ ìàññà áåëîãî èëè ñâåòëî-æåëòîãî öâåòà, 0,5 ìë — 1 ôëàêîí, èëè íàòèâíàÿ — ïðîçðà÷íàÿ æèäêîñòü æåëòîãî èëè êðàñíîãî öâåòà, 0,2 ìë — 1 ôëàêîí; íîðìàëüíàÿ ñûâîðîòêà êðîâè êóð (îòðèöàòåëüíûé êîíòðîëü), íå ñîäåðæàùàÿ àíòèòåë ê âèðóñó ÈÁÊ, öåëüíàÿ ëèîôèëèçèðîâàííàÿ — ñóõàÿ ïîðèñòàÿ ìàññà áåëîãî èëè ñâåòëî-æåëòîãî öâåòà, 0,5 ìë — 1 ôëàêîí, èëè íàòèâíàÿ — ïðîçðà÷íàÿ æèäêîñòü æåëòîãî èëè êðàñíîãî öâåòà, 0,2 ìë — 1 ôëàêîí; àíòèâèäîâîé èììóíîïåðîêñèäàçíûé êîíúþãàò ïðîòèâ lgG êóð, ëèîôèëèçèðîâàííûé, ñóõàÿ ïîðèñòàÿ ìàññà áåëîãî öâåòà, 0,5 ìë — 1 ôëàêîí, èëè êîíöåíòðàò ðàñòâîðà, ïðîçðà÷íàÿ áåñöâåòíàÿ æèäêîñòü, 3,0 ìë — 1 ôëàêîí, ðàáî÷åå ðàçâåäåíèå 1 : (óêàçûâàåòñÿ äëÿ êàæäîé ñåðèè). Íåñïåöèôè÷åñêèå êîìïîíåíòû: êîíöåíòðàò áóôåðíîãî ðàñòâîðà äëÿ ðàçâåäåíèÿ èñïûòóåìûõ è êîíòðîëüíûõ ïðîá, àíòèâèäîâîãî êîíúþãàòà, áåñöâåòíàÿ ïðîçðà÷íàÿ æèäêîñòü, 32,5 ìë — 1 ôëàêîí; êîíöåíòðàò ðàñòâîðà äëÿ ìåæýòàïíîé ïðîìûâêè, áåñöâåòíàÿ ïðîçðà÷íàÿ æèäêîñòü, 130 ìë — 1 ôëàêîí; ðàñòâîð ñóáñòðàòà ÀÁÒÑ (2,2′-àçèíî-äè[3-ýòèë]áåíçòèàçîëèíñóëüôîíîâàÿ êèñëîòà) ñ ïåðåêèñüþ âîäîðîäà — çåëåíîâàòàÿ ïðîçðà÷íàÿ æèäêîñòü, 25 ìë — 1 ôëàêîí; êîíöåíòðèðîâàííûé 5 êðàòíûé — 5 % ðàñòâîð äîäåöèëñóëüôàòà íàòðèÿ, áåñöâåòíàÿ ïðîçðà÷íàÿ æèäêîñòü, 5,0 ìë — 1 ôëàêîí. Äîïóñêàåòñÿ îáðàçîâàíèå îñàäêà áåëîãî öâåòà ïðè õðàíåíèè â õîëîäèëüíèêå. Íàáîð ðàññ÷èòàí íà àíàëèç 92 ïðîá ñûâîðîòîê êðîâè êóð íà êàæäîì ïëàíøåòå. Êîìïîíîâêà íàáîðà äîïóñêàåò âîçìîæíîñòü äðîáíîãî èñïîëüçîâàíèÿ êîìïîíåíòîâ äëÿ ïðîâåäåíèÿ èññëåäîâàíèé ïî ìåðå ïîñòóïëåíèÿ áèîëîãè÷åñêîãî ìàòåðèàëà.
Ôàðìàêîëîãè÷åñêèå ñâîéñòâà
Ñóùíîñòü ìåòîäà çàêëþ÷àåòñÿ â âûÿâëåíèè êîìïëåêñà àíòèãåí àíòèòåëî, îáðàçîâàâøåãîñÿ íà ïîâåðõíîñòè ëóíîê ïîëèñòèðîëîâîãî ïëàíøåòà. Ñïåöèôè÷åñêèé êîìïëåêñ âçàèìîäåéñòâóåò ñ àíòèâèäîâûì èììóíîëåðîêñèäàçíûì êîíúþãàòîì ïðîòèâ lgG êóð è âûçûâàåò ðàçëîæåíèå ñóáñòðàòà, îêðàøèâàÿ ñîäåðæèìîå ëóíîê ïëàíøåòà. Èíòåíñèâíîñòü îêðàñêè ïðÿìî ïðîïîðöèîíàëüíà êîíöåíòðàöèè àíòèòåë â èññëåäóåìîì ìàòåðèàëå.
Ïîêàçàíèÿ
Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñïåöèôè÷åñêèõ ãóìîðàëüíûõ àíòèòåë ïðîòèâ âèðóñà èíôåêöèîííîãî áðîíõèòà êóð (ÈÁÊ) â ñûâîðîòêàõ êðîâè êóð èììóíîôåðìåíòíûì ìåòîäîì (ÈÔÀ) ïðè èññëåäîâàíèè â îäíîì ðàçâåäåíèè.
Äîçû è ñïîñîá ïðèìåíåíèÿ
Äëÿ ïîñòàíîâêè ðåàêöèè èñïîëüçóþò: îäíî- è âîñüìèêàíàëüíûå àâòîìàòè÷åñêèå ïèïåòêè ïåðåìåííîãî îáúåìà äî 0,02 ìë äî 0,2 ìë è äî 1,0 ìë ñî ñìåííûìè íàêîíå÷íèêàìè, ìåðíóþ ëàáîðàòîðíóþ ïîñóäó, ïðîáèðêè äëÿ ðàçâåäåíèÿ ïðîá, äèñòèëëèðîâàííóþ èëè äåèîíèçèðîâàííóþ âîäó, òåðìîñòàò ñ òåìïåðàòóðîé íàãðåâà (37 + 0,5 °Ñ), áûòîâîé õîëîäèëüíèê, ñïåêòðîôîòîìåòð (ðèäåð) ëþáîé ìîäåëè ñ ôèëüòðîì íà 405 — 410 íì äëÿ ó÷åòîâ ðåçóëüòàòîâ ÈÔÀ. Ïåðåä íà÷àëîì ðàáîòû íàáîð ñ êîìïîíåíòàìè âûäåðæèâàþò 30 ìèíóò ïðè òåìïåðàòóðå 18 — 22 °Ñ. Áóôåð äëÿ ðàçâåäåíèÿ ïðîá, êîíòðîëüíûõ ñûâîðîòîê, àíòèêóðèíîãî êîíúþãàòà. Ñîäåðæèìîå ôëàêîíà ñ êîíöåíòðàòîì áóôåðà äëÿ ðàçâåäåíèÿ äîâîäÿò äèñòèëëèðîâàííîé âîäîé äî 250 ìë. Ðàáî÷èé ðàñòâîð êîíúþãàòà. Ñîäåðæèìîå ôëàêîíà ñ ëèîôèëèçèðîâàííûì êîíúþãàòîì ðàñòâîðÿþò â 0,5 ìë áóôåðà äëÿ ðàçâåäåíèÿ ïðîá. Äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ ðàáî÷åãî ðàçâåäåíèÿ êîíúþãàòà __ ìë êîíöåíòðàòà êîíúþãàòà äîâîäÿò áóôåðîì äëÿ ðàçâåäåíèÿ äî 10 ìë (â ðàñ÷åòå íà 1 ïëàíøåò). Ñîäåðæèìîå ôëàêîíà ñ ëèîôèëèçèðîâàííîé ïîëîæèòåëüíîé êîíòðîëüíîé ñûâîðîòêîé êðîâè êóð ðàñòâîðÿþò â 0,5 ìë áóôåðà äëÿ ðàçâåäåíèÿ ïðîá. Ãîòîâÿò ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì. Ñûâîðîòêè â íàòèâíîì âèäå ãîòîâû ê èñïîëüçîâàíèþ. Ñîäåðæèìîå ôëàêîíà ñ ëèîôèëèçèðîâàííîé îòðèöàòåëüíîé ñûâîðîòêîé êðîâè êóð ðàñòâîðÿþò â 0,5 ìë áóôåðà äëÿ ðàçâåäåíèÿ ïðîá. Ãîòîâÿò ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì. Ñûâîðîòêè â íàòèâíîì âèäå ãîòîâû ê èñïîëüçîâàíèþ. Ïðîìûâî÷íûé áóôåð. Ñîäåðæèìîå ôëàêîíà ñ êîíöåíòðàòîì áóôåðà äëÿ îòìûâêè äîâîäÿò äèñòèëëèðîâàííîé èëè äåèîíèçèðîâàííîé âîäîé äî 1000 ìë è òùàòåëüíî ïåðåìåøèâàþò. . Êîíöåíòðèðîâàííûé ðàçâîäÿò â 5 ðàç äèñòèëëèðîâàííîé èëè äåèîíèçèðîâàííîé âîäîé è òùàòåëüíî ïåðåìåøèâàþò (íàïðèìåð äëÿ ïîëó÷åíèÿ 12,5 ìë ê 2,5 ìë êîíöåíòðàòà äîáàâëÿþò 10 ìë âîäû). Ðàñõîä íà 1 ïëàíøåòó — 12,5 ìë. Âíèìàíèå! Åñëè ïðè õðàíåíèè 5 êðàòíîãî ðàñòâîðà îáðàçîâàëñÿ îñàäîê, åãî íåîáõîäèìî ïðîãðåòü ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå èëè ïðè òåìïåðàòóðå 37 °Ñ äî ïîëíîãî ðàñòâîðåíèÿ îñàäêà. Ðàçâåäåíèå èñïûòóåìûõ è êîíòðîëüíûõ ñûâîðîòîê. Âñå èñïûòóåìûå è êîíòðîëüíûå ïðîáû ñûâîðîòîê ðàçâîäÿò 1 : 400 áóôåðîì äëÿ ðàçâåäåíèÿ, èñïîëüçóÿ äëÿ êàæäîé ïðîáû íîâûé íàêîíå÷íèê. Ñ ýòîé öåëüþ ê 0,0025 ìë ñûâîðîòêè êðîâè êóð äîáàâëÿþò 1 ìë áóôåðà äëÿ ðàçâåäåíèÿ è òðèæäû ïèïåòèðóþò. Ïîñòàíîâêà ðåàêöèè. Èç êîìïëåêòà íàáîðà áåðóò ïëàíøåò, ñåíñèáèëèçèðîâàííûé àíòèãåíîì âèðóñà ÈÁÊ.  ëóíêè À1 — À2 âíîñÿò ïî 100 ìêë ïîäãîòîâëåííîãî îòðèöàòåëüíîãî êîíòðîëÿ.  ëóíêè À3 — À4 âíîñÿò ïî 100 ìêë ïîäãîòîâëåííîãî ïîëîæèòåëüíîãî êîíòðîëÿ.  îñòàëüíûå ëóíêè ïëàíøåòà âíîñÿò ïî 100 ìêë èñïûòóåìûõ ïðîá ñûâîðîòêè êðîâè. Ïëàíøåò íàêðûâàþò êðûøêîé è âûäåðæèâàþò 30 ìèíóò ïðè òåìïåðàòóðå 37 °Ñ, ïîñëå ÷åãî ëóíêè îñâîáîæäàþò îò ñîäåðæèìîãî ðåçêèì âñòðÿõèâàíèåì è òðèæäû ïðîìûâàþò ïðîìûâî÷íûì áóôåðîì (ïî 300 ìêë íà ëóíêó). Çàòåì æèäêîñòü îêîí÷àòåëüíî óäàëÿþò è ïëàíøåò ïîäñóøèâàþò ïîñòóêèâàíèåì ïî ñëîæåííîé â íåñêîëüêî ñëîåâ ôèëüòðîâàëüíîé áóìàãå. Âî âñå èñïîëüçóåìûå ëóíêè ïëàíøåòà âíîñÿò ïî 100 ìêë ðàáî÷åãî ðàñòâîðà êîíúþãàòà, íàêðûâàþò êðûøêîé è âûäåðæèâàþò 30 ìèíóò ïðè òåìïåðàòóðå 37 °Ñ. Òðèæäû ïîâòîðÿþò ïðîöåäóðó ïðîìûâàíèÿ. Âî âñå èñïîëüçóåìûå ëóíêè ïëàíøåòà âíîñÿò ïî 100 ìêë ðàñòâîðà ñóáñòðàòà, íàêðûâàþò êðûøêîé è âûäåðæèâàþò 10 ìèíóò ïðè òåìïåðàòóðå 22 — 28 °Ñ. Ðåàêöèþ îñòàíàâëèâàþò äîáàâëåíèåì â êàæäóþ èñïîëüçóåìóþ ëóíêó ïî 100 ìêë ïîäãîòîâëåííîãî . Ó÷åò ðåçóëüòàòîâ àíàëèçà ïðîâîäÿò èíñòðóìåíòàëüíûì ñïîñîáîì ñðàçó æå ïîñëå îñòàíîâêè ðåàêöèè, èñïîëüçóÿ ñïåêòðîôîòîìåòð (ðèäåð) ñ âåðòèêàëüíûì ëó÷îì ñâåòà ïðè äëèíå âîëíû 405 — 410 íì. Îöåíêà ðåçóëüòàòîâ ðåàêöèè: Ðåàêöèþ îöåíèâàþò ïî îòíîøåíèþ çíà÷åíèé îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè (ÎÏ) èñïûòóåìîé ïðîáû (S) ê çíà÷åíèþ îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè ïîëîæèòåëüíîãî êîíòðîëÿ (Ð), ÷òî îòðàæàåò îòíîñèòåëüíîå êîëè÷åñòâî àíòèòåë â èññëåäóåìûõ îáðàçöàõ. Ñðåäíåå çíà÷åíèå ÎÏ îòðèöàòåëüíûõ êîíòðîëåé äîëæíî áûòü íå âûøå 0,150. Ðàçíèöà ïîêàçàòåëåé ìåæäó ñðåäíèì çíà÷åíèåì ÎÏ ïîëîæèòåëüíîãî êîíòðîëÿ è ñðåäíèì çíà÷åíèåì îòðèöàòåëüíîãî êîíòðîëÿ äîïóñòèìà â äèàïàçîíå 0,350 — 0,800. Åñëè ïîëó÷åííûå çíà÷åíèÿ âûõîäÿò çà ïðåäåëû ýòèõ çíà÷åíèé, ðåçóëüòàòû ñ÷èòàþòñÿ íåäîñòîâåðíûìè è ðåàêöèþ ïîâòîðÿþò. Ðàñ÷åò S/Ð îòíîøåíèÿ:
S/P = (Çíà÷åíèå ÎÏ èñïûò. ñûâ-êè — ñð. çíà÷åíèå ÎÏ îòðèöàòåëüíîãî êîíòðîëÿ) / (Ñð. çíà÷åíèå ïîëîæ. êîíòðîëÿ — ñð. çíà÷åíèå îòðèöàòåëüíîãî êîíòðîëÿ)
Ïîëó÷åííûå çíà÷åíèÿ S/Ð ïîçâîëÿþò äèôôåðåíöèðîâàòü èñïûòóåìûå ñûâîðîòêè íà ïîëîæèòåëüíûå, îòðèöàòåëüíûå è ñîìíèòåëüíûå. Ïðîáû ñûâîðîòîê ñî çíà÷åíèÿìè S/Ð íèæå èëè ðàâíûìè 0,132 ñ÷èòàþòñÿ îòðèöàòåëüíûìè, åñëè áîëüøå 0,221 — ïîëîæèòåëüíûìè. Ðàñ÷åò òèòðà àíòèòåë. Òèòð àíòèòåë â èññëåäóåìûõ ïðîáàõ ñûâîðîòêè êðîâè, ðàçâåäåííûõ 1 : 400, âû÷èñëÿþò ïî ñëåäóþùåé ôîðìóëå: Òèòð = àïtilg (1,4727 (lg S/Ð) + 3,8372). Èíòåðïðåòàöèÿ ðåçóëüòàòîâ — ïî ðåçóëüòàòàì ÈÔÀ îïðåäåëÿþò íàïðÿæåííîñòü èììóíèòåòà â ïàðòèè ïðèâèòûõ öûïëÿò ïóòåì äåëåíèÿ êîëè÷åñòâà ïîëîæèòåëüíûõ ïðîá ê îáùåìó êîëè÷åñòâó èññëåäîâàííûõ ñûâîðîòîê è âûðàæàþò â ïðîöåíòàõ. Ïòèöó ñ÷èòàþò èììóííîé ê èíôåêöèîííîìó áðîíõèòó êóð ïðè íàïðÿæåííîñòè èììóíèòåòà 80 è áîëåå ïðîöåíòîâ (ò. å., åñëè â 80 è áîëåå ïðîöåíòàõ èññëåäîâàííûõ ïðîá ñûâîðîòîê êðîâè ïîëó÷åíû ïîëîæèòåëüíûå ðåçóëüòàòû). Ïòèöó âàêöèíèðóþò (ðåâàêöèíèðóþò) ïðè íàïðÿæåííîñòè èììóíèòåòà ìåíåå 80 %. Îáíàðóæåíèå àíòèòåë ó íåâàêöèíèðîâàííîé ïòèöû ñâèäåòåëüñòâóåò î âîçìîæíîé öèðêóëÿöèè â ñòàäå ïîëåâîãî âèðóñà ÈÁÊ.  òàêèõ ñëó÷àÿõ ÷åðåç 21 — 30 äíåé ïðîâîäÿò ïîâòîðíîå èññëåäîâàíèå ïðîá ñûâîðîòîê êðîâè, ïîëó÷åííûõ îò ýòèõ æå ïòèö. Íàðàñòàíèå òèòðîâ è (èëè) óâåëè÷åíèå êîëè÷åñòâà ïòèö ñ âûñîêèì óðîâíåì àíòèòåë ïðè íàëè÷èè êëèíè÷åñêèõ è ïàòîëîãîàíàòîìè÷åñêèõ ïðèçíàêîâ ÈÁÊ ÿâëÿåòñÿ îñíîâàíèåì äëÿ îáúÿâëåíèÿ â õîçÿéñòâå íåáëàãî
ïîëó÷èÿ ïî äàííîìó çàáîëåâàíèþ.
Îñîáûå óêàçàíèÿ
Ôëàêîíû è ïëàíøåòû áåç ýòèêåòîê, ñ íàðóøåíèåì öåëîñòíîñòè, èçìåíåíèåì êîíñèñòåíöèè èëè öâåòà, íàëè÷èåì ïîñòîðîííèõ ïðèìåñåé ïîäëåæàò âûáðàêîâêå è óòèëèçàöèè. Ðàáîòó ñ õèìè÷åñêèìè êîìïîíåíòàìè íàáîðà ñëåäóåò ïðîâîäèòü î÷åíü îñòîðîæíî. Ïðè ïîïàäàíèè èõ íà êîæó èëè ñëèçèñòûå îáîëî÷êè ðåêîìåíäóåòñÿ ïðîìûâàòü ïîðàæåííîå ìåñòî áîëüøèì êîëè÷åñòâîì âîäîïðîâîäíîé âîäû ïîä êðàíîì. Èñïîëüçîâàííûå ïëàíøåòû îáåççàðàæèâàþò 3 % ðàñòâîðîì õëîðíîé èçâåñòè èëè äðóãèìè ñèëüíûìè îêèñëèòåëÿìè. Çàïðåùàåòñÿ ïðèåì ïèùè è âîäû, êóðåíèå â ïîìåùåíèè, ãäå ïðîâîäÿòñÿ ðàáîòû ñ êîìïîíåíòàìè íàáîðà.
Óñëîâèÿ õðàíåíèÿ
 çàùèùåííîì îò ñâåòà ìåñòå è òåìïåðàòóðå îò 2 äî 8 °Ñ. Íå äîïóñêàåòñÿ çàìîðàæèâàíèå êîìïîíåíòîâ. Ñðîê ãîäíîñòè íàáîðà — 12 ìåñÿöåâ.
ÏðîèçâîäèòåëüÔåäåðàëüíûé öåíòð îõðàíû çäîðîâüÿ æèâîòíûõ ÔÃÓ (ÂÍÈÈÇÆ ÔÃÓ), Ðîññèÿ
Àäðåñ: 600901, ã. Âëàäèìèð, ìêð. Þðüåâåö.
Òåë.: (4922) 26-06-14
Òåë./ôàêñ: (4922) 26-38-77
E-mail: mail@arriah.ruÏîäðîáíåå î ïðîèçâîäèòåëå
Âñå ïðåïàðàòû ïðîèçâîäñòâà Ôåäåðàëüíûé öåíòð îõðàíû çäîðîâüÿ æèâîòíûõ ÔÃÓ (ÂÍÈÈÇÆ ÔÃÓ), Ðîññèÿ
ÏðîäàâåöÌåñòî Âàøåé ðåêëàìû
Ïî âîïðîñàì ðàçìåùåíèÿ èíôîðìàöèè
î âåòåðèíàðíûõ ïðåïàðàòàõ è êîðìîâûõ äîáàâêàõ
â Ýëåêòðîííîì ñïðàâî÷íèêå «Âåòåðèíàðíûå ïðåïàðàòû â Ðîññèè»
è çàêëþ÷åíèÿ äîãîâîðîâ íà ïóáëèêàöèþ
îáðàùàéòåñü â ÎÎÎ «Âåòòîðã» ïî ýëåêòðîííîé ïî÷òå: vettorg@mail.ru
Âíèìàíèå! Ýòîò ñïðàâî÷íèê äîñòóïåí íà CD. Ïîäðîáíàÿ èíôîðìàöèÿ îáî âñåõ ïðåïàðàòàõ, óäîáíûé ïîèñê, àâòîìàòè÷åñêîå îáíîâëåíèå êàòàëîãà. Ïîäðîáíåå »»
Àëôàâèòíûé óêàçàòåëü
| Ïðåïàðàòû ïî ïðîèçâîäèòåëÿì
| Ïðåïàðàòû ïî çàáîëåâàíèÿì
| Ïîèñê
- Êóïèòü ÍÀÁÎÐ ÄËß ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈß ÀÍÒÈÒÅË Ê ÂÈÐÓÑÓ ÈÍÔÅÊÖÈÎÍÍÎÃÎ ÁÐÎÍÕÈÒÀ ÊÓÐ (ÈÁÊ) ÈÌÌÓÍÎÔÅÐÌÅÍÒÍÛÌ ÌÅÒÎÄÎÌ îïòîì.
Íàçâàíèå
ÍÀÁÎÐ ÄËß ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈß ÀÍÒÈÒÅË Ê ÂÈÐÓÑÓ ÈÍÔÅÊÖÈÎÍÍÎÃÎ ÁÐÎÍÕÈÒÀ ÊÓÐ (ÈÁÊ) ÈÌÌÓÍÎÔÅÐÌÅÍÒÍÛÌ ÌÅÒÎÄÎÌ
Ñîñòàâ è ôîðìà âûïóñêà
 ñîñòàâ íàáîðà âõîäÿò 9 êîìïîíåíòîâ (Ê1 — Ê9). Èììóíîñïåöèôè÷åñêèå êîìïîíåíòû: Ê1 — ïîëîæèòåëüíàÿ ê âèðóñó ÈÁÊ ñûâîðîòêà êðîâè êóð (ïîëîæèòåëüíûé êîíòðîëü) öåëüíàÿ ëèîôèëèçèðîâàííàÿ, 1 ìë èëè â íàòèâíîì âèäå — 0,2 ìë — 1 àìïóëà (ôëàêîí); Ê2 — îòðèöàòåëüíàÿ ñûâîðîòêà êðîâè êóð (îòðèöàòåëüíûé êîíòðîëü), íå ñîäåðæàùàÿ àíòèòåë ê âèðóñó ÈÁÊ, öåëüíàÿ, ëèîôèëèçèðîâàííàÿ, 1,0 ìë èëè â íàòèâíîì âèäå — 0,2 ìë — 1 àìïóëà (ôëàêîí); Ê3 — î÷èùåííûé àíòèãåí âèðóñà ÈÁÊ, àäñîðáèðîâàííûé â ëóíêàõ ïëàíøåòà äëÿ ÈÔÀ — 2 ïëàíøåòà; Ê4 — àíòèâèäîâîé èììóíîïåðîêñèäàçíûé êîíúþãàò ïðîòèâ lgG êóð, ñóõîé â îáúåìå 0,5 ìë èëè â íàòèâíîì âèäå — 0,2 ìë — 1 àìïóëà, ðàáî÷åå ðàçâåäåíèå 1: (óêàçûâàåòñÿ äëÿ êàæäîé ñåðèè). Íåñïåöèôè÷åñêèå êîìïîíåíòû: Ê5 — íàáîð ñîëåé äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ áóôåðíîãî ðàñòâîðà äëÿ èñïûòóåìûõ è êîíòðîëüíûõ ïðîá, àíòèâèäîâîãî êîíúþãàòà è ìåæýòàïíîé ïðîìûâêè: òðèñ (îêñèìåòèë) àìèíîìåòàí — 0,97 ã (Ê5.1), òðèñ (îêñèìåòèë) àìèíîìåòàí ãèäðîõëîðèä — 6,61 ã (Ê5.2), íàòðèé õëîðèñòûé’ — 11,7 ã (Ê5.3); Ê6 — íàáîð ñîëåé äëÿ ïðèãîòîâëåíèé ñóáñòðàòíîãî áóôåðà: íàòðèé ôîñôîðíîêèñëûé äâóçàìåùåííûé — 5,37 ã — 1 ôëàêîí (Ê6.1), ëèìîííàÿ êèñëîòà — 1,57 ã — 1 ôëàêîí (Ê6.2); Ê7 — äåòåðãåíò òâèí 20, æèäêèé — 1 ìë — 1 ôëàêîí; Ê8 — ñóáñòðàò — îðòîôåíèëåíäèàìèí, 1 òàáëåòêà âî ôëàêîíå; Ê9 — ïåðåêèñü âîäîðîäà, ãèäðîïåðèò, òàáëåòêà 1 ã — 1 øò. â óïàêîâêå.
Ôàðìàêîëîãè÷åñêèå ñâîéñòâà
Ñóùíîñòü ìåòîäà çàêëþ÷àåòñÿ â âûÿâëåíèè îáðàçîâàâøåãîñÿ íà ïîâåðõíîñòè ëóíîê ïîëèñòèðîëîâîãî ïëàíøåòà êîìïëåêñà àíòèãåí-àíòèòåëî. Ñïåöèôè÷åñêèé êîìïëåêñ âçàèìîäåéñòâóåò ñ àíòèâèäîâûì èììóíîïåðîêñèäàçíûì êîíúþãàòîì ïðîòèâ lgG êóð è âûçûâàåò ðàçëîæåíèå ñóáñòðàòà, îêðàøèâàÿ ñîäåðæèìîå ëóíîê ïëàíøåòà. Íàáîð ðàññ÷èòàí íà ïðîâåäåíèå 176 àíàëèçîâ ñûâîðîòîê êðîâè êóð ïðè èññëåäîâàíèè â îäíîì ðàçâåäåíèè 1 : 400, ïðè ðàñòèòðîâêå ñûâîðîòîê îò 1 : 100 äî 1 : 12800 — íà 20 àíàëèçîâ.
Ïîêàçàíèÿ
Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë ïðîòèâ âèðóñà èíôåêöèîííîãî áðîíõèòà êóð (ÈÁÊ) â ñûâîðîòêàõ êðîâè êóð èììóíîôåðìåíòíûì ìåòîäîì (ÈÔÌ).
Äîçû è ñïîñîá ïðèìåíåíèÿ
Äëÿ èññëåäîâàíèÿ â ëàáîðàòîðèþ äîñòàâëÿþò èç ïòèöåõîçÿéñòâ ñûâîðîòêè êðîâè êóð îò 25 ãîëîâ (ïî 0,2 — 0,3 ìë). Ïðîáû ñûâîðîòîê õðàíÿò â ìîðîçèëüíîé êàìåðå áûòîâîãî õîëîäèëüíèêà. Äëÿ ïîñòàíîâêè ìåòîäà ÈÔÀ èñïîëüçóþò: îäíî- è âîñüìèêàíàëüíûå àâòîìàòè÷åñêèå ïèïåòêè ïîñòîÿííîãî è ïåðåìåííîãî îáúåìà äî 0,02 ìë è äî 0,2 ìë ñî ñìåííûìè íàêîíå÷íèêàìè, òåðìîñòàò ñ òåìïåðàòóðîé íàãðåâà (37 + 0,5 °Ñ), áûòîâîé õîëîäèëüíèê, ðÍ ìåòð, ðèäåð ëþáîé ìîäåëè äëÿ ó÷åòîâ ðåçóëüòàòîâ ÈÔÀ. Ïåðåä ïðèãîòîâëåíèåì ðàáî÷èõ ðàñòâîðîâ íàáîð ñ êîìïîíåíòàìè âûäåðæèâàþò 30 ìèíóò, ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå (20 — 22 °Ñ). Ðàñòâîð ¹ 1. Ñîäåðæèìîå ôëàêîíîâ Ê5.1, Ê5.2 è Ê5.3 ðàñòâîðÿþò â 1000 ìë äèñòèëëèðîâàííîé âîäû è èçìåðÿþò ïîêàçàíèå ðÍ, êîòîðîå äîëæíî áûòü â ïðåäåëàõ 7,4 — 7,6. Çàòåì â ýòîò ðàñòâîð âíîñÿò ñîäåðæèìîå ôëàêîíà Ê7, ïîëó÷àÿ êîíå÷íóþ êîíöåíòðàöèþ äåòåðãåíòà 0,01 %. Äàííûé ðàñòâîð èñïîëüçóþò äëÿ ðàçâåäåíèÿ êîíòðîëüíûõ ñûâîðîòîê, èñïûòóåìûõ ïðîá, àíòèâèäîâîãî êîíúþãàòà è ìåæýòàïíîé ïðîìûâêè. Ðàñòâîð ¹ 2. Ôîñôàòíî-öèòðàòíûé áóôåð ðÍ 4,9 — 5,0. Äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ áóôåðà ñîäåðæèìîå ôëàêîíà Ê6.1 ðàñòâîðÿþò â 50 ìë äèñòèëëèðîâàííîé âîäû, ñîäåðæèìîå ôëàêîíà Ê6.2 òàêæå â 50 ìë äèñòèëëèðîâàííîé âîäû. Çàòåì ñìåøèâàþò 24,3 ìë ðàñòâîðà Ê6.1 ñ 25,7 ìë ðàñòâîðà Ê6.2, äîáàâëÿþò 50 ìë äèñòèëëèðîâàííîé âîäû. Ïîëó÷åííûé ðàñòâîð äîëæåí èìåòü ðÍ 4,9 — 5,0 ïðè íåîáõîäèìîñòè äîáàâëÿþò êèñëûé (Ê6.2) èëè ùåëî÷íîé (Ê6.1) êîìïîíåíòû. Ðàñòâîð ¹ 3. Ñîäåðæèìîå ôëàêîíà Ê1 ðàñòâîðÿþò â 1,0 ìë ðàñòâîðà ¹ 1. Ãîòîâÿò ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì. Ñûâîðîòêà Ê1 â íàòèâíîì âèäå ãîòîâà äëÿ èñïîëüçîâàíèÿ ïî âûøåîïèñàííîìó ñïîñîáó. Ðàñòâîð ¹ 4. Ñîäåðæèìîå ôëàêîíà Ê2 ñ îòðèöàòåëüíîé ñûâîðîòêîé êðîâè êóð ðàñòâîðÿþò â 1 ìë ðàñòâîðà ¹ 1. Ðàñòâîð ¹ 4 ãîòîâÿò ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì. Ñûâîðîòêà Ê2 â íàòèâíîì âèäå ãîòîâà äëÿ èñïîëüçîâàíèÿ ïî âûøåîïèñàííîìó ìåòîäó. Ðàñòâîð ¹ 5. Ñîäåðæèìîå ôëàêîíà Ê4 ñ àíòèâèäîâûì êîíúþãàòîì ðàñòâîðÿþò â 0,5 ìë ðàñòâîðà ¹ 1. Äëÿ ïîëó÷åíèÿ ðàáî÷åãî ðàçâåäåíèÿ 1: èç ýòîãî ôëàêîíà èëè èç íàòèâíîãî ïðåïàðàòà êîíúþãàòà îòáèðàþò ìë íà 10 ìë ðàñòâîðà ¹1 (íà 1 ïëàíøåò), ãîòîâÿò ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì. Ðàñòâîð ¹ 6. 1 òàáëåòêó ãèäðîïåðèòà ðàñòâîðÿþò â 20 ìë äèñòèëëèðîâàííîé âîäû. Ðàñòâîð ¹ 7. Ñóáñòðàòíî-èíäèêàòîðíàÿ ñìåñü. Ñîäåðæèìîå ôëàêîíà Ê8 (òàáëåòêó) ðàñòâîðÿþò â 20 ìë ðàñòâîðà ¹ 2, âñòðÿõèâàþò äî ïîëíîãî ðàñòâîðåíèÿ è äîáàâëÿþò íà êàæäûå 10 ìë ýòîãî ðàñòâîðà ïî 0,4 ìë ðàñòâîðà ¹ 6. Ãîòîâÿò ðàñòâîð ¹ 7 íåïîñðåäñòâåííî ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì.  ñâÿçè ñ âûñîêîé òîêñè÷íîñòüþ ÎÔÄ ïðèãîòîâëåíèå ñóáñòðàòíî-èíäèêàòîðíîé ñìåñè ïðîâîäèòü â ðåçèíîâûõ ïåð÷àòêàõ, èçáåãàÿ ïîïàäàíèÿ íà êîæó è ñëèçèñòûå îáîëî÷êè. Ïîñòàíîâêà ðåàêöèè — èç êîìïëåêòà íàáîðà áåðóò ïëàíøåò (Ê3), â ëóíêàõ êîòîðîãî àäñîðáèðîâàí î÷èùåííûé àíòèãåí âèðóñà ÈÁÊ, è èñïîëüçóþò äëÿ ïîñòàíîâêè èììóíîôåðìåíòíîãî ìåòîäà. Ðàçâåäåíèå ñûâîðîòîê — îáðàçöû èññëåäóåìûõ ïðîá ñûâîðîòîê êðîâè ðàçâîäÿò 1 : 100 ðàñòâîðîì ¹ 1. Ñ ýòîé öåëüþ ê 0,01 ìë ñûâîðîòêè êðîâè êóð äîáàâëÿþò 1 ìë ðàñòâîðà ¹ 1 è ïåðåìåøèâàþò.  ëóíêè ðÿäîâ ïëàíøåòà Â1 — 12… Í1 — 12 âíîñÿò ïî 0,1 ìë ðàñòâîðà ¹ 1, à â ëóíêè À2 — 11 âíîñÿò ïî 0,2 ìë èññëåäóåìûõ ïðîá ñûâîðîòîê êðîâè, è ïðîâîäÿò ðàñòèòðîâêó ïî âåðòèêàëüíûì ðÿäàì, íà÷èíàÿ ñ 1 : 100 äî 1 : 12800.  ëóíêè À1 è À12 âíîñÿò ðàçâåäåíèÿ 1 : 100 êîíòðîëüíûõ (îòðèöàòåëüíîé è ïîëîæèòåëüíîé) ñûâîðîòîê è òàêæå ïðîâîäÿò ðàñòèòðîâêó ïî âåðòèêàëüíûì ðÿäàì. Èç ïîñëåäíèõ ëóíîê Í1 — Í12 óäàëÿþò ïî 0,1 ìë. Ïðè îáíàðóæåíèè âûñîêèõ òèòðîâ àíòèòåë â èñïûòóåìûõ ïðîáàõ ïðîâîäÿò ðàñòèòðîâêó ïî ãîðèçîíòàëüíûì ðÿäàì ïëàíøåòà. Ïëàíøåò îñòîðîæíî âñòðÿõèâàþò, çàêðûâàþò êðûøêîé è ïåðåíîñÿò â òåðìîñòàò íà 37 °Ñ íà 2 ÷àñà. Çàòåì ëóíêè ïëàíøåòà îñâîáîæäàþò îò ñîäåðæèìîãî ïóòåì âûòðÿõèâàíèÿ è òðåõêðàòíî ïðîìûâàþò ðàñòâîðîì ¹ 1. Ãîòîâÿò ðàñòâîð ¹ 5 ïî âûøåîïèñàííîìó ñïîñîáó è âíîñÿò âî âñå ëóíêè ïëàíøåòà ïî 0,1 ìë, çàòåì îïÿòü ïîìåùàþò â òåðìîñòàò íà 1 ÷àñ è ïðîìûâàþò. Ãîòîâÿò ðàñòâîð ¹ 7 è âíîñÿò âî âñå ëóíêè ïî 0,1 ìë. Îñòàâëÿþò ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå â òåìíîì ìåñòå 5 — 10 ìèíóò. Îñòàíàâëèâàþò ðåàêöèþ äîáàâëåíèåì â êàæäóþ ëóíêó 0,05 ìë ñåðíîé êèñëîòû, ïðèãîòîâëåííîé ïóòåì ðàñòâîðåíèÿ 2 ìë êîíöåíòðèðîâàííîé ñåðíîé êèñëîòû â 10 ìë äèñòèëëèðîâàííîé âîäû (â íàáîðå îòñóòñòâóåò). Ó÷åò ðåçóëüòàòîâ àíàëèçà ïðîâîäÿò ïîñëå îñòàíîâêè ðåàêöèè îäíèì èç ñïîñîáîâ: âèçóàëüíî — ïî èíòåíñèâíîñòè îêðàøèâàíèÿ ñîäåðæèìîãî ëóíîê ïëàíøåòà èëè èíñòðóìåíòàëüíî — ñ ïîìîùüþ ñïåêòðîôîòîìåòðà ñ âåðòèêàëüíûì ëó÷îì ïðè äëèíå âîëíû 492 íì. Ïðè âèçóàëüíîì ñïîñîáå ó÷åòà ïåðâîíà÷àëüíî ïðîâîäÿò îöåíêó ðåçóëüòàòîâ ïî êîíòðîëüíûì ëóíêàì ïëàíøåòà: ïîëîæèòåëüíûé êîíòðîëü ïðè ðàñòèòðîâêå îêðàøèâàåòñÿ â æåëòûé öâåò ðàçëè÷íîé èíòåíñèâíîñòè.  ëóíêàõ ñ îòðèöàòåëüíûì êîíòðîëåì ðàñòâîð îñòàåòñÿ íåîêðàøåííûì èëè íåçíà÷èòåëüíî æåëòååò. Ïðè âèçóàëüíîì ó÷åòå ñðàâíèâàþò îêðàñêó ñîäåðæèìîãî ëóíîê ïëàíøåòà èñïûòóåìûõ ïðîá ñ îêðàñêîé ëóíîê êîíòðîëüíûõ îáðàçöîâ. Çà òèòð èñïûòóåìîé ñûâîðîòêè ïðèíèìàþò ïîñëåäíåå ðàçâåäåíèå åå, ïðè êîòîðîì íàáëþäàþò âèäèìîå ãëàçîì öâåòîâîå îêðàøèâàíèå, áîëåå èíòåíñèâíîå ïî ñðàâíåíèþ ñ îòðèöàòåëüíûì êîíòðîëåì. Èíñòðóìåíòàëüíûé ôîòîìåòðè÷åñêèé ó÷åò ðåçóëüòàòîâ àíàëèçà ïîçâîëÿåò êîëè÷åñòâåííî îöåíèòü òèòðû ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë â èññëåäóåìûõ ïðîáàõ ïóòåì èçìåðåíèÿ çíà÷åíèé îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè (ÎÏ 492 íì). Êîíå÷íûì ðàçâåäåíèåì èñïûòóåìîé ñûâîðîòêè ñ÷èòàåòñÿ ïîñëåäíåå åå ðàçâåäåíèå, â êîòîðîì îïòè÷åñêàÿ ïëîòíîñòü ïðåâûøàåò òàêîâóþ îòðèöàòåëüíîãî êîíòðîëÿ â 2 — 2,1 ðàçà. Ðàñ÷åò òèòðà ñûâîðîòîê ïðè ïîñòàíîâêå ðåàêöèè â îäíîì ðàçâåäåíèè 1 : 400. Âûÿâëåíèå ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë â ñûâîðîòêàõ êðîâè ìîæíî ïðîâîäèòü è áåç ðàñòèòðîâêè èñïûòóåìûõ ñûâîðîòîê.  ýòîì ñëó÷àå âî âñå ëóíêè ïëàíøåòà À2 — 12 …Í2 — 12 âíîñÿò ïî 0,1 ìë èññëåäóåìûõ ïðîá ñûâîðîòîê â ðàçâåäåíèè 1:400 â îäíîé èëè äâóõ ïîâòîðíîñòÿõ, èñïîëüçóÿ ïî 1(2) ëóíêè íà êàæäóþ ïðîáó.  äâå ëóíêè Â1, Ñ1 âíîñÿò ïîëîæèòåëüíûå, à â äâå ïîñëåäóþùèå Ä1, Å1 — îòðèöàòåëüíûå êîíòðîëüíûå ñûâîðîòêè â ðàçâåäåíèè 1 : 400. Ëóíêè F1, G1, H1 ñëóæàò êîíòðîëåì êîíúþãàòà è çàïîëíÿþòñÿ ïî 0,1 ìë ðàñòâîðîì ¹ 1. Ó÷åò ðåçóëüòàòîâ ðåàêöèè ïðîâîäèòñÿ ñïåêòðîôîòîìåòðè÷åñêè ïðè äëèíå âîëíû 492 íì. Äëÿ ïðåäïîëàãàåìîãî âàðèàíòà ó÷åòà ðàçëè÷èÿ ìåæäó ñðåäíèìè çíà÷åíèÿìè ïîëîæèòåëüíîé
è îòðèöàòåëüíîé êîíòðîëüíûõ ñûâîðîòîê (PCx — NCx) äîëæíî áûòü áîëåå 0,5. Çíà÷åíèÿ îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè äëÿ îòðèöàòåëüíîãî êîíòðîëÿ äîëæíû áûòü ìåíåå èëè ðàâíû 0,150. Íàëè÷èå èëè îòñóòñòâèå àíòèòåë ê âèðóñó ÈÁÊ îïðåäåëÿþò ïóòåì âû÷èñëåíèÿ îòíîøåíèÿ ñðåäíåé îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè èñïûòóåìîé ñûâîðîòêè ïðè äëèíå âîëíû 492 íì ê ñðåäíåìó çíà÷åíèþ îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè (ÎÏ) ïîëîæèòåëüíîãî êîíòðîëÿ (S/Ð). Ïîëîæèòåëüíàÿ êîíòðîëüíàÿ ñûâîðîòêà ñòàíäàðòèçîâàíà è èìååò îïðåäåëåííûé òèòð àíòèòåë ê âèðóñó ÈÁÊ. Åñëè S/Ð îòíîøåíèå ìåíüøå èëè ðàâíî 0,15, ñûâîðîòêà áóäåò ñ÷èòàòüñÿ îòðèöàòåëüíîé. Åñëè S/Ð îòíîøåíèå áîëüøå ÷åì 0,15, ñûâîðîòêà ñîäåðæèò àíòèòåëà ê âèðóñó ÈÁÊ. Êîíå÷íîå çíà÷åíèå òèòðà ìîæåò áûòü ïîäñ÷èòàíî ïî S/Ð-îòíîøåíèþ ïðè ðàçâåäåíèè 1 : 400. Ðàñ÷åò òèòðà.
Ðàñ÷åò ñðåäíåãî çíà÷åíèÿ ÎÏ îòðèöàòåëüíîãî êîíòðîëÿ (NCx):
(Çíà÷åíèå Â1 ÎÏ(492) + Çíà÷åíèå Ñ1 ÎÏ(492))/2 = NCx
Ïðèìåð: (0,100 + 0,120)/2 = 0,110 (NCx = 0,110).
ÍÀÁÎÐ ÄËß ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈß ÀÍÒÈÒÅË Ê ÂÈÐÓÑÓ ÈÍÔÅÊÖÈÎÍÍÎÃÎ ÁÐÎÍÕÈÒÀ ÊÓÐ (ÈÁÊ) ÈÌÌÓÍÎÔÅÐÌÅÍÒÍÛÌ ÌÅÒÎÄÎÌ
Ñîñòàâ è ôîðìà âûïóñêà
 ñîñòàâ íàáîðà âõîäÿò 9 êîìïîíåíòîâ (Ê1 — Ê9). Èììóíîñïåöèôè÷åñêèå êîìïîíåíòû: Ê1 — ïîëîæèòåëüíàÿ ê âèðóñó ÈÁÊ ñûâîðîòêà êðîâè êóð (ïîëîæèòåëüíûé êîíòðîëü) öåëüíàÿ ëèîôèëèçèðîâàííàÿ, 1 ìë èëè â íàòèâíîì âèäå — 0,2 ìë — 1 àìïóëà (ôëàêîí); Ê2 — îòðèöàòåëüíàÿ ñûâîðîòêà êðîâè êóð (îòðèöàòåëüíûé êîíòðîëü), íå ñîäåðæàùàÿ àíòèòåë ê âèðóñó ÈÁÊ, öåëüíàÿ, ëèîôèëèçèðîâàííàÿ, 1,0 ìë èëè â íàòèâíîì âèäå — 0,2 ìë — 1 àìïóëà (ôëàêîí); Ê3 — î÷èùåííûé àíòèãåí âèðóñà ÈÁÊ, àäñîðáèðîâàííûé â ëóíêàõ ïëàíøåòà äëÿ ÈÔÀ — 2 ïëàíøåòà; Ê4 — àíòèâèäîâîé èììóíîïåðîêñèäàçíûé êîíúþãàò ïðîòèâ lgG êóð, ñóõîé â îáúåìå 0,5 ìë èëè â íàòèâíîì âèäå — 0,2 ìë — 1 àìïóëà, ðàáî÷åå ðàçâåäåíèå 1: (óêàçûâàåòñÿ äëÿ êàæäîé ñåðèè). Íåñïåöèôè÷åñêèå êîìïîíåíòû: Ê5 — íàáîð ñîëåé äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ áóôåðíîãî ðàñòâîðà äëÿ èñïûòóåìûõ è êîíòðîëüíûõ ïðîá, àíòèâèäîâîãî êîíúþãàòà è ìåæýòàïíîé ïðîìûâêè: òðèñ (îêñèìåòèë) àìèíîìåòàí — 0,97 ã (Ê5.1), òðèñ (îêñèìåòèë) àìèíîìåòàí ãèäðîõëîðèä — 6,61 ã (Ê5.2), íàòðèé õëîðèñòûé’ — 11,7 ã (Ê5.3); Ê6 — íàáîð ñîëåé äëÿ ïðèãîòîâëåíèé ñóáñòðàòíîãî áóôåðà: íàòðèé ôîñôîðíîêèñëûé äâóçàìåùåííûé — 5,37 ã — 1 ôëàêîí (Ê6.1), ëèìîííàÿ êèñëîòà — 1,57 ã — 1 ôëàêîí (Ê6.2); Ê7 — äåòåðãåíò òâèí 20, æèäêèé — 1 ìë — 1 ôëàêîí; Ê8 — ñóáñòðàò — îðòîôåíèëåíäèàìèí, 1 òàáëåòêà âî ôëàêîíå; Ê9 — ïåðåêèñü âîäîðîäà, ãèäðîïåðèò, òàáëåòêà 1 ã — 1 øò. â óïàêîâêå.
Ôàðìàêîëîãè÷åñêèå ñâîéñòâà
Ñóùíîñòü ìåòîäà çàêëþ÷àåòñÿ â âûÿâëåíèè îáðàçîâàâøåãîñÿ íà ïîâåðõíîñòè ëóíîê ïîëèñòèðîëîâîãî ïëàíøåòà êîìïëåêñà àíòèãåí-àíòèòåëî. Ñïåöèôè÷åñêèé êîìïëåêñ âçàèìîäåéñòâóåò ñ àíòèâèäîâûì èììóíîïåðîêñèäàçíûì êîíúþãàòîì ïðîòèâ lgG êóð è âûçûâàåò ðàçëîæåíèå ñóáñòðàòà, îêðàøèâàÿ ñîäåðæèìîå ëóíîê ïëàíøåòà. Íàáîð ðàññ÷èòàí íà ïðîâåäåíèå 176 àíàëèçîâ ñûâîðîòîê êðîâè êóð ïðè èññëåäîâàíèè â îäíîì ðàçâåäåíèè 1 : 400, ïðè ðàñòèòðîâêå ñûâîðîòîê îò 1 : 100 äî 1 : 12800 — íà 20 àíàëèçîâ.
Ïîêàçàíèÿ
Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë ïðîòèâ âèðóñà èíôåêöèîííîãî áðîíõèòà êóð (ÈÁÊ) â ñûâîðîòêàõ êðîâè êóð èììóíîôåðìåíòíûì ìåòîäîì (ÈÔÌ).
Äîçû è ñïîñîá ïðèìåíåíèÿ
Äëÿ èññëåäîâàíèÿ â ëàáîðàòîðèþ äîñòàâëÿþò èç ïòèöåõîçÿéñòâ ñûâîðîòêè êðîâè êóð îò 25 ãîëîâ (ïî 0,2 — 0,3 ìë). Ïðîáû ñûâîðîòîê õðàíÿò â ìîðîçèëüíîé êàìåðå áûòîâîãî õîëîäèëüíèêà. Äëÿ ïîñòàíîâêè ìåòîäà ÈÔÀ èñïîëüçóþò: îäíî- è âîñüìèêàíàëüíûå àâòîìàòè÷åñêèå ïèïåòêè ïîñòîÿííîãî è ïåðåìåííîãî îáúåìà äî 0,02 ìë è äî 0,2 ìë ñî ñìåííûìè íàêîíå÷íèêàìè, òåðìîñòàò ñ òåìïåðàòóðîé íàãðåâà (37 + 0,5 °Ñ), áûòîâîé õîëîäèëüíèê, ðÍ ìåòð, ðèäåð ëþáîé ìîäåëè äëÿ ó÷åòîâ ðåçóëüòàòîâ ÈÔÀ. Ïåðåä ïðèãîòîâëåíèåì ðàáî÷èõ ðàñòâîðîâ íàáîð ñ êîìïîíåíòàìè âûäåðæèâàþò 30 ìèíóò, ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå (20 — 22 °Ñ). Ðàñòâîð ¹ 1. Ñîäåðæèìîå ôëàêîíîâ Ê5.1, Ê5.2 è Ê5.3 ðàñòâîðÿþò â 1000 ìë äèñòèëëèðîâàííîé âîäû è èçìåðÿþò ïîêàçàíèå ðÍ, êîòîðîå äîëæíî áûòü â ïðåäåëàõ 7,4 — 7,6. Çàòåì â ýòîò ðàñòâîð âíîñÿò ñîäåðæèìîå ôëàêîíà Ê7, ïîëó÷àÿ êîíå÷íóþ êîíöåíòðàöèþ äåòåðãåíòà 0,01 %. Äàííûé ðàñòâîð èñïîëüçóþò äëÿ ðàçâåäåíèÿ êîíòðîëüíûõ ñûâîðîòîê, èñïûòóåìûõ ïðîá, àíòèâèäîâîãî êîíúþãàòà è ìåæýòàïíîé ïðîìûâêè. Ðàñòâîð ¹ 2. Ôîñôàòíî-öèòðàòíûé áóôåð ðÍ 4,9 — 5,0. Äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ áóôåðà ñîäåðæèìîå ôëàêîíà Ê6.1 ðàñòâîðÿþò â 50 ìë äèñòèëëèðîâàííîé âîäû, ñîäåðæèìîå ôëàêîíà Ê6.2 òàêæå â 50 ìë äèñòèëëèðîâàííîé âîäû. Çàòåì ñìåøèâàþò 24,3 ìë ðàñòâîðà Ê6.1 ñ 25,7 ìë ðàñòâîðà Ê6.2, äîáàâëÿþò 50 ìë äèñòèëëèðîâàííîé âîäû. Ïîëó÷åííûé ðàñòâîð äîëæåí èìåòü ðÍ 4,9 — 5,0 ïðè íåîáõîäèìîñòè äîáàâëÿþò êèñëûé (Ê6.2) èëè ùåëî÷íîé (Ê6.1) êîìïîíåíòû. Ðàñòâîð ¹ 3. Ñîäåðæèìîå ôëàêîíà Ê1 ðàñòâîðÿþò â 1,0 ìë ðàñòâîðà ¹ 1. Ãîòîâÿò ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì. Ñûâîðîòêà Ê1 â íàòèâíîì âèäå ãîòîâà äëÿ èñïîëüçîâàíèÿ ïî âûøåîïèñàííîìó ñïîñîáó. Ðàñòâîð ¹ 4. Ñîäåðæèìîå ôëàêîíà Ê2 ñ îòðèöàòåëüíîé ñûâîðîòêîé êðîâè êóð ðàñòâîðÿþò â 1 ìë ðàñòâîðà ¹ 1. Ðàñòâîð ¹ 4 ãîòîâÿò ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì. Ñûâîðîòêà Ê2 â íàòèâíîì âèäå ãîòîâà äëÿ èñïîëüçîâàíèÿ ïî âûøåîïèñàííîìó ìåòîäó. Ðàñòâîð ¹ 5. Ñîäåðæèìîå ôëàêîíà Ê4 ñ àíòèâèäîâûì êîíúþãàòîì ðàñòâîðÿþò â 0,5 ìë ðàñòâîðà ¹ 1. Äëÿ ïîëó÷åíèÿ ðàáî÷åãî ðàçâåäåíèÿ 1: èç ýòîãî ôëàêîíà èëè èç íàòèâíîãî ïðåïàðàòà êîíúþãàòà îòáèðàþò ìë íà 10 ìë ðàñòâîðà ¹1 (íà 1 ïëàíøåò), ãîòîâÿò ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì. Ðàñòâîð ¹ 6. 1 òàáëåòêó ãèäðîïåðèòà ðàñòâîðÿþò â 20 ìë äèñòèëëèðîâàííîé âîäû. Ðàñòâîð ¹ 7. Ñóáñòðàòíî-èíäèêàòîðíàÿ ñìåñü. Ñîäåðæèìîå ôëàêîíà Ê8 (òàáëåòêó) ðàñòâîðÿþò â 20 ìë ðàñòâîðà ¹ 2, âñòðÿõèâàþò äî ïîëíîãî ðàñòâîðåíèÿ è äîáàâëÿþò íà êàæäûå 10 ìë ýòîãî ðàñòâîðà ïî 0,4 ìë ðàñòâîðà ¹ 6. Ãîòîâÿò ðàñòâîð ¹ 7 íåïîñðåäñòâåííî ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì.  ñâÿçè ñ âûñîêîé òîêñè÷íîñòüþ ÎÔÄ ïðèãîòîâëåíèå ñóáñòðàòíî-èíäèêàòîðíîé ñìåñè ïðîâîäèòü â ðåçèíîâûõ ïåð÷àòêàõ, èçáåãàÿ ïîïàäàíèÿ íà êîæó è ñëèçèñòûå îáîëî÷êè. Ïîñòàíîâêà ðåàêöèè — èç êîìïëåêòà íàáîðà áåðóò ïëàíøåò (Ê3), â ëóíêàõ êîòîðîãî àäñîðáèðîâàí î÷èùåííûé àíòèãåí âèðóñà ÈÁÊ, è èñïîëüçóþò äëÿ ïîñòàíîâêè èììóíîôåðìåíòíîãî ìåòîäà. Ðàçâåäåíèå ñûâîðîòîê — îáðàçöû èññëåäóåìûõ ïðîá ñûâîðîòîê êðîâè ðàçâîäÿò 1 : 100 ðàñòâîðîì ¹ 1. Ñ ýòîé öåëüþ ê 0,01 ìë ñûâîðîòêè êðîâè êóð äîáàâëÿþò 1 ìë ðàñòâîðà ¹ 1 è ïåðåìåøèâàþò.  ëóíêè ðÿäîâ ïëàíøåòà Â1 — 12… Í1 — 12 âíîñÿò ïî 0,1 ìë ðàñòâîðà ¹ 1, à â ëóíêè À2 — 11 âíîñÿò ïî 0,2 ìë èññëåäóåìûõ ïðîá ñûâîðîòîê êðîâè, è ïðîâîäÿò ðàñòèòðîâêó ïî âåðòèêàëüíûì ðÿäàì, íà÷èíàÿ ñ 1 : 100 äî 1 : 12800.  ëóíêè À1 è À12 âíîñÿò ðàçâåäåíèÿ 1 : 100 êîíòðîëüíûõ (îòðèöàòåëüíîé è ïîëîæèòåëüíîé) ñûâîðîòîê è òàêæå ïðîâîäÿò ðàñòèòðîâêó ïî âåðòèêàëüíûì ðÿäàì. Èç ïîñëåäíèõ ëóíîê Í1 — Í12 óäàëÿþò ïî 0,1 ìë. Ïðè îáíàðóæåíèè âûñîêèõ òèòðîâ àíòèòåë â èñïûòóåìûõ ïðîáàõ ïðîâîäÿò ðàñòèòðîâêó ïî ãîðèçîíòàëüíûì ðÿäàì ïëàíøåòà. Ïëàíøåò îñòîðîæíî âñòðÿõèâàþò, çàêðûâàþò êðûøêîé è ïåðåíîñÿò â òåðìîñòàò íà 37 °Ñ íà 2 ÷àñà. Çàòåì ëóíêè ïëàíøåòà îñâîáîæäàþò îò ñîäåðæèìîãî ïóòåì âûòðÿõèâàíèÿ è òðåõêðàòíî ïðîìûâàþò ðàñòâîðîì ¹ 1. Ãîòîâÿò ðàñòâîð ¹ 5 ïî âûøåîïèñàííîìó ñïîñîáó è âíîñÿò âî âñå ëóíêè ïëàíøåòà ïî 0,1 ìë, çàòåì îïÿòü ïîìåùàþò â òåðìîñòàò íà 1 ÷àñ è ïðîìûâàþò. Ãîòîâÿò ðàñòâîð ¹ 7 è âíîñÿò âî âñå ëóíêè ïî 0,1 ìë. Îñòàâëÿþò ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå â òåìíîì ìåñòå 5 — 10 ìèíóò. Îñòàíàâëèâàþò ðåàêöèþ äîáàâëåíèåì â êàæäóþ ëóíêó 0,05 ìë ñåðíîé êèñëîòû, ïðèãîòîâëåííîé ïóòåì ðàñòâîðåíèÿ 2 ìë êîíöåíòðèðîâàííîé ñåðíîé êèñëîòû â 10 ìë äèñòèëëèðîâàííîé âîäû (â íàáîðå îòñóòñòâóåò). Ó÷åò ðåçóëüòàòîâ àíàëèçà ïðîâîäÿò ïîñëå îñòàíîâêè ðåàêöèè îäíèì èç ñïîñîáîâ: âèçóàëüíî — ïî èíòåíñèâíîñòè îêðàøèâàíèÿ ñîäåðæèìîãî ëóíîê ïëàíøåòà èëè èíñòðóìåíòàëüíî — ñ ïîìîùüþ ñïåêòðîôîòîìåòðà ñ âåðòèêàëüíûì ëó÷îì ïðè äëèíå âîëíû 492 íì. Ïðè âèçóàëüíîì ñïîñîáå ó÷åòà ïåðâîíà÷àëüíî ïðîâîäÿò îöåíêó ðåçóëüòàòîâ ïî êîíòðîëüíûì ëóíêàì ïëàíøåòà: ïîëîæèòåëüíûé êîíòðîëü ïðè ðàñòèòðîâêå îêðàøèâàåòñÿ â æåëòûé öâåò ðàçëè÷íîé èíòåíñèâíîñòè.  ëóíêàõ ñ îòðèöàòåëüíûì êîíòðîëåì ðàñòâîð îñòàåòñÿ íåîêðàøåííûì èëè íåçíà÷èòåëüíî æåëòååò. Ïðè âèçóàëüíîì ó÷åòå ñðàâíèâàþò îêðàñêó ñîäåðæèìîãî ëóíîê ïëàíøåòà èñïûòóåìûõ ïðîá ñ îêðàñêîé ëóíîê êîíòðîëüíûõ îáðàçöîâ. Çà òèòð èñïûòóåìîé ñûâîðîòêè ïðèíèìàþò ïîñëåäíåå ðàçâåäåíèå åå, ïðè êîòîðîì íàáëþäàþò âèäèìîå ãëàçîì öâåòîâîå îêðàøèâàíèå, áîëåå èíòåíñèâíîå ïî ñðàâíåíèþ ñ îòðèöàòåëüíûì êîíòðîëåì. Èíñòðóìåíòàëüíûé ôîòîìåòðè÷åñêèé ó÷åò ðåçóëüòàòîâ àíàëèçà ïîçâîëÿåò êîëè÷åñòâåííî îöåíèòü òèòðû ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë â èññëåäóåìûõ ïðîáàõ ïóòåì èçìåðåíèÿ çíà÷åíèé îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè (ÎÏ 492 íì). Êîíå÷íûì ðàçâåäåíèåì èñïûòóåìîé ñûâîðîòêè ñ÷èòàåòñÿ ïîñëåäíåå åå ðàçâåäåíèå, â êîòîðîì îïòè÷åñêàÿ ïëîòíîñòü ïðåâûøàåò òàêîâóþ îòðèöàòåëüíîãî êîíòðîëÿ â 2 — 2,1 ðàçà. Ðàñ÷åò òèòðà ñûâîðîòîê ïðè ïîñòàíîâêå ðåàêöèè â îäíîì ðàçâåäåíèè 1 : 400. Âûÿâëåíèå ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë â ñûâîðîòêàõ êðîâè ìîæíî ïðîâîäèòü è áåç ðàñòèòðîâêè èñïûòóåìûõ ñûâîðîòîê.  ýòîì ñëó÷àå âî âñå ëóíêè ïëàíøåòà À2 — 12 …Í2 — 12 âíîñÿò ïî 0,1 ìë èññëåäóåìûõ ïðîá ñûâîðîòîê â ðàçâåäåíèè 1:400 â îäíîé èëè äâóõ ïîâòîðíîñòÿõ, èñïîëüçóÿ ïî 1(2) ëóíêè íà êàæäóþ ïðîáó.  äâå ëóíêè Â1, Ñ1 âíîñÿò ïîëîæèòåëüíûå, à â äâå ïîñëåäóþùèå Ä1, Å1 — îòðèöàòåëüíûå êîíòðîëüíûå ñûâîðîòêè â ðàçâåäåíèè 1 : 400. Ëóíêè F1, G1, H1 ñëóæàò êîíòðîëåì êîíúþãàòà è çàïîëíÿþòñÿ ïî 0,1 ìë ðàñòâîðîì ¹ 1. Ó÷åò ðåçóëüòàòîâ ðåàêöèè ïðîâîäèòñÿ ñïåêòðîôîòîìåòðè÷åñêè ïðè äëèíå âîëíû 492 íì. Äëÿ ïðåäïîëàãàåìîãî âàðèàíòà ó÷åòà ðàçëè÷èÿ ìåæäó ñðåäíèìè çíà÷åíèÿìè ïîëîæèòåëüíîé
è îòðèöàòåëüíîé êîíòðîëüíûõ ñûâîðîòîê (PCx — NCx) äîëæíî áûòü áîëåå 0,5. Çíà÷åíèÿ îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè äëÿ îòðèöàòåëüíîãî êîíòðîëÿ äîëæíû áûòü ìåíåå èëè ðàâíû 0,150. Íàëè÷èå èëè îòñóòñòâèå àíòèòåë ê âèðóñó ÈÁÊ îïðåäåëÿþò ïóòåì âû÷èñëåíèÿ îòíîøåíèÿ ñðåäíåé îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè èñïûòóåìîé ñûâîðîòêè ïðè äëèíå âîëíû 492 íì ê ñðåäíåìó çíà÷åíèþ îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè (ÎÏ) ïîëîæèòåëüíîãî êîíòðîëÿ (S/Ð). Ïîëîæèòåëüíàÿ êîíòðîëüíàÿ ñûâîðîòêà ñòàíäàðòèçîâàíà è èìååò îïðåäåëåííûé òèòð àíòèòåë ê âèðóñó ÈÁÊ. Åñëè S/Ð îòíîøåíèå ìåíüøå èëè ðàâíî 0,15, ñûâîðîòêà áóäåò ñ÷èòàòüñÿ îòðèöàòåëüíîé. Åñëè S/Ð îòíîøåíèå áîëüøå ÷åì 0,15, ñûâîðîòêà ñîäåðæèò àíòèòåëà ê âèðóñó ÈÁÊ. Êîíå÷íîå çíà÷åíèå òèòðà ìîæåò áûòü ïîäñ÷èòàíî ïî S/Ð-îòíîøåíèþ ïðè ðàçâåäåíèè 1 : 400. Ðàñ÷åò òèòðà.
Ðàñ÷åò ñðåäíåãî çíà÷åíèÿ ÎÏ îòðèöàòåëüíîãî êîíòðîëÿ (NCx):
(Çíà÷åíèå Â1 ÎÏ(492) + Çíà÷åíèå Ñ1 ÎÏ(492))/2 = NCx
Ïðèìåð: (0,100 + 0,120)/2 = 0,110 (NCx = 0,110).
Ðàñ÷åò ñðåäíåãî çíà÷åíèÿ ÎÏ ïîëîæèòåëüíîãî êîíòðîëÿ (PCx):
(Çíà÷åíèå D1 ÎÏ(492) + Çíà÷åíèå E1 ÎÏ(492))/2 = PCx
Ïðèìåð: (0,720 + 0,690)/2 = 0,755 (PCx = 0,755).
Ðàñ÷åò S/Ð îòíîøåíèÿ:
(ÎÏ(492) èñïûòóåìîé ñûâîðîòêè — NCx)/(PCx — NCx) = S/P
Ïðèìåð: Çíà÷åíèå îáðàçöà = 0,480
(0,480 — 0,110)/(0,755 — 0,110) = 0,370/0,645 = 0,574 (Çíà÷åíèå S/Ð=0,574).
Ðàñ÷åò òèòðà. log10Òèòð = 1,08(log10S/Ð) + 3,92. Ïðèìåð: S/Ð îòíîøåíèå ðàâíî 0,574. log10Òèòð = 1,08(log100,574) + 3,92. log10Òèòð = 1,08(-0,241)+3,92. log10Òèòð = 3,660. Òèòð = 103,660 = 4571. Èíòåðïðåòàöèÿ ðåçóëüòàòîâ. Ïî ðåçóëüòàòàì ÈÔÀ îïðåäåëÿþò íàïðÿæåííîñòü èììóíèòåòà â ïàðòèè ïðèâèòûõ öûïëÿò ïóòåì äåëåíèÿ êîëè÷åñòâà ïðîá ñ òèòðîì àíòèòåë 1 : 800 è âûøå ê îáùåìó êîëè÷åñòâó èññëåäîâàííûõ ñûâîðîòîê è âûðàæàþò â ïðîöåíòàõ. Ïòèöó ñ÷èòàþò èììóííîé ê âèðóñó èíôåêöèîííîãî áðîíõèòà ïðè íàïðÿæåííîñòè èììóíèòåòà 80 è áîëåå ïðîöåíòîâ (ò. å., åñëè â 80 è áîëåå ïðîöåíòàõ ïðîá ñûâîðîòîê êðîâè òèòð àíòèòåë äîñòèãàåò çíà÷åíèÿ 1 : 800 è âûøå). Ïòèöó âàêöèíèðóþò (ðåâàêöèíèðóþò) ïðè íàïðÿæåííîñòè èììóíèòåòà ìåíåå 80 %. Îáíàðóæåíèå âûñîêîãî óðîâíÿ àíòèòåë (áîëåå 1 : 800) ñâèäåòåëüñòâóåò î âîçìîæíîé öèðêóëÿöèè â ñòàäå ïîëåâîãî âèðóñà èíôåêöèîííîãî áðîíõèòà.  òàêèõ ñëó÷àÿõ ÷åðåç 21 — 30 äíåé ïðîâîäÿò ïîâòîðíîå èññëåäîâàíèå ïðîá ñûâîðîòîê êðîâè, ïîëó÷åííûõ îò ýòèõ æå ïòèö. Íàðàñòàíèå òèòðîâ è (èëè) óâåëè÷åíèå êîëè÷åñòâà ïòèö ñ âûñîêèì óðîâíåì àíòèòåë ïðè íàëè÷èè êëèíè÷åñêèõ è ïàòîëîãîàíàòîìè÷åñêèõ ïðèçíàêîâ ÈÁÊ ÿâëÿåòñÿ îñíîâàíèåì äëÿ îáúÿâëåíèÿ â õîçÿéñòâå íåáëàãîïîëó÷èÿ ïî äàííîìó çàáîëåâàíèþ.
Îñîáûå óêàçàíèÿ
Àìïóëû, ôëàêîíû áåç ýòèêåòîê, ñ òðåùèíàìè, ñ èçìåíåííîé êîíñèñòåíöèåé ïîäëåæàò âûáðàêîâêå è îáåççàðàæèâàíèþ è óòèëèçàöèè.
Óñëîâèÿ õðàíåíèÿ
 çàùèùåííîì îò ñâåòà ìåñòå è òåìïåðàòóðå îò 2 äî 8 °Ñ. Ñðîê ãîäíîñòè íàáîðà — 12 ìåñÿöåâ.
ÏðîèçâîäèòåëüÔåäåðàëüíûé öåíòð îõðàíû çäîðîâüÿ æèâîòíûõ ÔÃÓ (ÂÍÈÈÇÆ ÔÃÓ), Ðîññèÿ
Àäðåñ: 600901, ã. Âëàäèìèð, ìêð. Þðüåâåö.
Òåë.: (4922) 26-06-14
Òåë./ôàêñ: (4922) 26-38-77
E-mail: mail@arriah.ruÏîäðîáíåå î ïðîèçâîäèòåëå
Âñå ïðåïàðàòû ïðîèçâîäñòâà Ôåäåðàëüíûé öåíòð îõðàíû çäîðîâüÿ æèâîòíûõ ÔÃÓ (ÂÍÈÈÇÆ ÔÃÓ), Ðîññèÿ
ÏðîäàâåöÌåñòî Âàøåé ðåêëàìû
Ïî âîïðîñàì ðàçìåùåíèÿ èíôîðìàöèè
î âåòåðèíàðíûõ ïðåïàðàòàõ è êîðìîâûõ äîáàâêàõ
â Ýëåêòðîííîì ñïðàâî÷íèêå «Âåòåðèíàðíûå ïðåïàðàòû â Ðîññèè»
è çàêëþ÷åíèÿ äîãîâîðîâ íà ïóáëèêàöèþ
îáðàùàéòåñü â ÎÎÎ «Âåòòîðã» ïî ýëåêòðîííîé ïî÷òå: vettorg@mail.ru
