Инфекционный бронхит кур ифа
Инфекционный бронхит кур (ИБК) — высококонтагиозная болезнь, характеризующаяся поражением органов дыхания у молодняка, поражением репродуктивных органов и потерей продуктивности у взрослых кур-несушек, а также нефрозонефритным синдромом.
Историческая справка. Впервые болезнь описали Шалк и Гаук в 1931году в Северной Америке под названием «новая респираторная болезнь цыплят».
В настоящее время болезнь широко распространена в Канаде, Аргентине, Англии, Японии, Голландии, Италии, Франции, Австралии, Дании, Швейцарии, Германии и других странах.
Первое сообщение об инфекционном бронхите в СССР сделал П.М. Сопиков в 1946году.
Экономический ущерб от ИБК в основном складывается из снижения яйценоскости у кур. Если птица заболевает в начале яйценоскости, то продуктивность сохраняется на низком уровне в течение всего периода содержания (яйценоскость 20-30%). При заражении птицы в середине и в конце продуктивного периода яйценоскость резко понижается и тоже не восстанавливается. От больных кур нельзя использовать племенные яйца. До 20-40% цыплят, переболевших инфекционным бронхитом, подлежат выбраковке вследствие недоразвития.
Возбудитель болезни относится к группе миксовирусов; размер вириона 80-250mµ. Вирус проходит через фильтры Зейца ЕК и Беркефельда N, V,W. В настоящее время учеными описано уже около 30 разновидностей серотипов вируса ИБН. Хорошо размножается в куриных эмбрионах и околоплодных оболочках. Максимально вирус накапливается через 48-96 часов после заражения. После заражения эмбрион отстает в росте, иногда образуются некротические очаги в печени, почках. Характерным признаком у погибших эмбрионов считается скручивание тела. Вирус вызывает появление в организме специфических антител. Максимум антителообразования приходится на 40-день после заражения птицы.
Антитела у птицы обнаруживаются в течение года. Куры-несушки способны передавать антитела потомству. Это предохраняет птицу от заражения в первые 10-15дней жизни.
Вирус инактивируется при 56° в течении 10-15 минут. В лиофилизированном состоянии вирус выживал свыше 500дней (температура 4°), при -20-30°-458 дней. Ультрафиолетовые лучи разрушают вирус. Вирус ИБК погибает под действием 3%-ного горячего раствора едкого натрия через 3 часа, раствора хлорной извести с содержанием 6,5 % активного хлора- через 6часов, 0,5%-ного раствора формальдегида — через 3 часа, 5%-ного горячего раствора Демпа-12 –через 6часов,0,5%-ного раствора формальдегида- через 3 часа, 5%-ного горячего раствора Демпа-12- через 6часов, 1%-ные растворы фенола, формалина –через 3минуты.
Эпизоотические данные. К заболеванию в основном восприимчивы цыплята в возрасте до 30 дней, а также куры в возрасте 5-6месяцев. Кроме домашней птицы, заболевание регистрируется у фазанов и перепелов.
Особенностью болезни является то, что через 3-5дней после ее появления она быстро поражает всех птиц в стаде. Вначале заболевают цыплята, а затем болезнь переходит на молодых и взрослых кур.
Основной источник инфекции – больные цыплята, куры и переболевшая птица. Больная птица выделяет вирус в течении 3 месяцев с слизистыми истечениями из дыхательных путей, с яйцом и пометом; Длительность вирусносительства у переболевшей птицы доходит до 12 месяцев. Птица заражается главным образом аэрогенным путем. Факторами передачи служит – корм, вода, подстилка и другие предметы, загрязненные выделениями больной птицы.
Особую роль в распространении инфекции играют инкубационные яйца. Вирус в яйце удается обнаружить через 2-43 дня после инфицирования кур-несушек. Занос инфекционного бронхита кур в благополучные хозяйства чаще всего происходит при нарушении ветеринарно-санитарных требований к инкубационным яйцам.
Инфекционный бронхит птиц обычно протекает в форме эпизоотии только в «новых» хозяйствах. Течение болезни во многом зависит от физиологического состояния, возрастного соотношения птиц в хозяйстве и наличия таких болезней, как микоплазмоз, ларинготрахеит, болезнь Ньюкасла и др.
В неблагополучных хозяйствах инфекция приобретает стационарный характер и переходит в хроническую стационарную инфекцию. Часто вспышка инфекционного бронхита возникает после переохлаждения птицы, при повышенном содержании вредных газов в помещении, после применения живых вирусвакцин, которые провоцируют скрытое течение заболевания.
Патогенез. Цикл инфекции продолжается 18-20 дней. В первые 1-3 дня после внедрения вируса в слизистую оболочку трахеи и бронхов возникает воспалительный процесс, вызывающий к 7-му дню гипертрофию эпителия и выраженную отечность, который сопровождается обильным выделением слизи и экссудата. Затем в течение 12-18 дней наступает так называемая фаза иммунитета, при которой восстанавливается пораженный эпителий и происходит лимфоидоклеточная инфильтрация. Течение заболевания и смена фаз зависит от дозы вируса, поступившего при заражении.
Вирус бронхита может выделятся из легких, содержимого трахеи, кишечника в течение 10-21 дня; из крови, почки, печени и мозга не всегда удается выделить вирус.
В патогенезе болезни большое значение имеет условнопатогенная микрофлора (возбудители микоплазмоза, колисептицемии, стрептококкоза, заразного насморка и др.), которая осложняет течение болезни.
Симптомы и течение болезни. Инкубационный период 3-10 дней.
При инфекционном бронхите на современном этапе принято отмечать три клинических синдрома.
Респираторный синдром сопровождается респираторными симптомами и наблюдается у молодых цыплят:
Через 18-36часов после внедрения вируса у цыплят наступает угнетенное состояние; крылья опускаются, дыхание становится затрудненным и напряженным, появляются хрипы в трахее, чихание, выделения из ноздрей, коньюктивиты, риниты, отмечается опухание подглазничных синусов. Цыплята становятся вялыми, малоподвижными, теряют аппетит, дыхание хриплое, цыплята дышат с открытым ртом, сбиваются кучками вокруг источников тепла. В результате удушья из-за скопившегося экссудата в трахее у цыплят до 2-х недельного возраста иногда может наступить внезапная гибель. Болезнь в основном протекает остро (1-3недели), летальность среди цыплят 1-3 недельного возраста колеблется в пределах 5-33%.У цыплят старше 2-х недель также отмечается одышка,кашель, сухие хрипы, чихание, коньюктивит, незначительные истечения из клюва; которые могут исчезнуть через 8-14 дней. Переболевание инфекционным бронхитом у молодняка вызывает задержку роста.
У взрослой птицы болезнь протекает с синдромом поражения репродуктивных органов:
Клинические признаки не характерны (ринит, конъюктивит, у отдельных птиц затрудненное дыхание). На 7-14 день болезни на любой стадии яйцекладки владельцы птицы отмечают снижении е яйценоскости. Переболевшие птицы несут дефектные яйца, яйценоскость полностью не востанавливается даже после выздоровления. Выводимость цыплят падает.
Отдельные штаммы вируса ИБК могут в течение первых 2 недель болезни вызвать нефрозонефритный синдром который сопровождается поражением почек и мочеточников с одновременным отложением уратов.
При нефрозонефритическом синдроме у больной птицы диагносцируем депрессию, диарею с примесью уратов. Болезнь протекает остро, ветспециалисты в начале вспышки отмечают у больной птицы нечеткие признаки респираторного синдрома. Если вирус ИБК в хозяйстве циркулирует впервые, то летальность при этой форме доходит до 70%.
Патологоанатомические изменения. В трахее и крупных бронхах трупов цыплят обнаруживают кровоизлияния, серозный или катаральный эксудат. У молодняка кровоизлияния часто создают своеобразную исчерченность. У взрослой птицы обычным признаком инфекционного бронхита является недоразвитость яичника и яйцевода (инфантилизм) От 5 до 50% больные куры откладывают яйца с известковым налетом, около 25%-с мягкой и 12%-с тонкой скорлупой. В 20% случаев в белке находят дифтеритические массы вследствие сальпингита. Часто яйца имеют сдавленную вытянутую форму, скорлупа приобретает своеобразный измятый вид. В яйцеводе находим кисты,в оболочке яичника иногда кровоизлияния. У взрослой птицы яичник и яйцевод недоразвиты, яйцевые фолликулы атрофированы. Типичные патологоанатомические изменения при осложнениях условнопатогенной микрофлорой обнаруживают в респираторных органах. Стенка воздухоносного мешка теряет прозрачность, покрыта фибринозным наложениями. Слизистая оболочка трахеи покрыта серозным и слизистым экссудатом. После удаления экссудата видна отечная подслизистая ткань, с кровоизлияниями. В легких обнаруживаем фибринозные сгустки. Печень –застойная гиперемия, края притуплены. Печень и почки-явления зернистой дистрофии.
При нерозонефритном синдроме при патвскрытии находим: набухание и пестроту рисунка почек, мочевые канальцы переполнены уратами, их находим и на серозных покровах внутренних органов. У павших куриных эмбрионов- нефроз, серозная пневмония, скопление уратов в аллантоисе, отечность и гиперемия плодовых оболочек. Особенно характерен признак на 6-9-й день «карликовость» эмбрионов.
При осложненной форме инфекционного бронхита воспалительные процессы в воздухоносных мешках напоминают респираторный микоплазмоз. При гистологическом исследовании в трахее обнаруживают мононуклеарную пролиферацию и инфильтрацию цилиндрического эпителия, отечность слизистых оболочек.
Диагноз. Предварительный диагноз в условиях хозяйства можно поставить на основании эпизоотических, клинических и патологоанатомических данных. Для окончательной постановки диагноза необходимо выделение и индентификация вируса.
От погибших или вынужденно убитых цыплят делают соскобы со слизистых оболочек. Патологический материал суспензируют в мясопептонном бульоне. После осаждения крупных кусочков тканей надосадочную жидкость используют для выделения вируса. Жидкость вводят в аллантоисную полость куриных эмбрионов и в трахею 4-6 цыплят 10-20-дневного возраста. При положительной биопробе через 18-36 часов у цыплят возникают клинические признаки инфекционного бронхита. Для типизации вируса применяют реакцию нейтрализации со специфической сывороткой на куриных эмбрионах, а также реакцию преципитации в агаровом геле. Используют иммунофлуоресценцию и реакцию нейтрализации со специфическими сыворотками, ретроспективную диагностику- анализ сывороток крови в ИФА, РН, РНГА, исследование молекулярно биологическими методами с использованием ПЦР. Решающее значение имеет заражение восприимчивых птиц, 10-20-дневных цыплят и куриных зародышей.
Дифференциальный диагноз. Необходимо исключить ларинготрахеит, оспу, псевдочуму, респираторный микоплазмоз, заразный насморк, грипп, инфекционную бурсальную болезнь, гемофилез.
Инфекционный ларинготрахеит в отличие от бронхита поражает взрослую птицу; у цыплят данное заболевание протекает обычно в виде серозного коньюктивита. При заражении куриных эмбрионов вирусом инфекционного ларинготрахеита и оспы возникают узелковые и очаговые поражения на аллантоисной оболочке.
Типичная оспа у птиц отличается от инфекционного бронхита по возникающим кожным поражениям, конъюнктивальная форма оспы сопровождается конъюнктивитами, положительной фолликулярной пробой.
Псевдочума сопровождается поражением органов дыхания, расстройством кишечника, параличами и парезами конечностей. Вирус псевдочумы обладает способностью гемоагглютинировать эритроциты животных и птиц, что не отмечается у не обработанного трипсином вируса инфекционного бронхита.
Некоторые трудности могут возникнуть при дифференциации инфекционного бронхита от респираторного микоплазмоза. В этом случае нужно сделать посевы на бульон и агар Эдварда для выделения культуры микоплазмы, которые затем проверяют на патогенность. В практических условиях инфекционный бронхит часто осложняется возбудителем респираторного микоплазмоза и заболевание у птиц протекает по типу ассоциированных инфекций.
Лечение. В неблагополучном птичнике применяют дезинфицирующие препараты (хлорскипидар, йодид алюминия, раствор Люголя, глютекс, виркон С и другие) в виде аэрозолей.
Иммунитет и иммунизация. Переболевшая ИБК птица становится устойчивой к тому штамму, который вызвал заболевание. Продолжительность приобретенного иммунитета 4-6 месяцев. Установлено, что материнские антитела не имеют большого значения в защите птицы от ИБК, поэтому в птицеводческих хозяйствах необходимо проводить вакцинацию цыплят в суточном возрасте интраназально или спрей – методом.
Ветспециалисты должны знать, что применять живые вирус-вакцины необходимо с большой осторожностью, ввиду того, что они могут спровоцировать в хозяйстве респираторный микоплазмоз, колисептицемию. На сегодняшний день наиболее широкое распространение в птицеводческих хозяйствах получили две живые вирус-вакцины из штамма АМ и вакцина Н-120.
Родительское стадо на птицефабриках перед яйцекладкой внутримышечно прививают ассоциированной инактивированной вакциной против ИБК, БН, ИББ и ССЯ-76.
Профилактика и меры борьбы. Для предупреждения инфекционного бронхита необходимо строго выполнять комплекс мероприятий, предусмотренных Ветеринарно-санитарными правилами для птицеводческих хозяйств (ферм) и требованиями при их проектировании, особенно при клеточном безвыгульном содержании.
Не допускается любая хозяйственная связь птицефабрик и птицеферм с неблагополучным по ИБК хозяйством. При комплектовании птицехозяйства разрешается использовать инкубационное яйцо только от клинически здоровой птицы.
Дезинфекцию инкубационного яйца, инкубаторов и птичников проводят с соблюдением существующих правил и рекомендаций.
Комплектование птичников и зон проводят только одновозрастной птицей. Во всех помещениях, где содержится птица необходимо осуществлять постоянный контроль за воздухообменом.
Вновь завезенную птицу карантинируют в течение 3 недель.
При установлении заболевания птиц ИБК в соответствии с приказом Министерства сельского хозяйства РФ №476 от19 декабря 2011года « Об утверждении перечня заразных, в том числе особо опасных, болезней животных, по которым могут устанавливаться ограничительные мероприятия (карантин) постановлением Губернатора области в хозяйстве вводятся ограничения. По условиям ограничений в хозяйстве запрещается:
- Вывоз яиц для племенных целей в благополучные хозяйства, а также яиц и эмбрионов для производства ветеринарных и медицинских препаратов и научно – исследовательских работ.
- Вывоз живой птицы в другие хозяйства и продажу ее населению.
- Перемещение птицы, кормов и инвентаря из неблагополучных птичников, отделений, ферм в другое помещение где содержится здоровая птица.
- Ввоз птицы из других хозяйств.
В птицеводческих хозяйствах имеющих бройлерное направление весь санитарный брак подвергают технической утилизации, остальную больную птицу направляют для промпереработки на птицекомбинат. Условно здоровую птицу по окончании технологического цикла направляют на убой без ограничений.
При выявлении ИБК в племенных хозяйствах больную взрослую птицу отправляют на убой, а условно здоровую используют для получения пищевого яйца с последующим убоем. Также поступают с родительским стадом в товарных хозяйствах.
Разрешается:
- Вывоз птицы, для пищевых целей после дезинфекции парами формальдегида согласно действующей инструкции.
- Вывоз пера и пуха после дезинфекции.
- Вывоз мяса от вынужденно убитой птицы в сеть общественного питания внутри района или на переработку; мясо от условно-здоровой птицы реализуется на общих основаниях.
- Вывоз птицы на птицеперерабатывающие предприятия с соблюдением всех ветеринарно-санитарных правил по предупреждению распространения инфекции в процессе транспортировки.
В период ограничений прекращают инкубацию сроком на 2месяца. При этом проводят тщательную очистку и дезинфекции инкубатория и инкубаторов.
В птичниках, где возникло ИБК явно больных и сильно отстающих в росте цыплят убивают и утилизируют, а для остальных улучшают кормление и принимают меры по устранению сквозняков и нормализации воздухообмена. Одновременно с этим проводят два раза в неделю текущую дезинфекцию в присутствии птицы гипохлоритом натрия, содержащим 2% активного хлора, из расчета 0,5 мл на 1м³ помещения при экспозиции 15минут.
Территорию вокруг птичника и дороги птицеводческого хозяйства дезинфицируют один раз в неделю 3%-ным раствором едкой щелочи на 1%-ном растворе формалина.
Ограничения с хозяйства снимают через 2месяца после выявления последнего случая заболевания птицы и проведения заключительной дезинфекции.
ÌÅÒÎÄÈ×ÅÑÊÈÅ ÓÊÀÇÀÍÈß
äëÿ âûÿâëåíèÿ àíòèòåë ê âèðóñó
èíôåêöèîííîãî áðîíõèòà êóð
èììóíîôåðìåíòíûì àíàëèçîì
1. ÎÁÙÈÅ ÏÎËÎÆÅÍÈß
2. ÏÎÐßÄÎÊ ÏÐÈÌÅÍÅÍÈß
3. ÏÎÄÃÎÒÎÂÊÀ ÊÎÍÏÎÍÅÍÒÎÂ ÍÀÁÎÐÀ È ÎÁÎÐÓÄÎÂÀÍÈß ÄËß ÏÐÎÂÅÄÅÍÈß ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈÉ
4. ÏÐÎÂÅÄÅÍÈÅ ÈÌÌÍÓÍÎÔÅÐÌÅÍÒÍÎÃÎ ÀÍÀËÈÇÀ
5. Ó×ÅÒ ÐÅÇÓËÜÒÀÒΠÐÅÀÊÖÈÈ
6. ÎÖÅÍÊÀ ÐÅÇÓËÜÒÀÒÎÂ ÐÅÀÊÖÈÈ
ÌÈÍÈÑÒÅÐÑÒÂÎ
ÑÅËÜÑÊÎÃÎ ÕÎÇßÉÑÒÂÀ ÓÒÂÅÐÆÄÀÞ
ÐÎÑÑÈÉÑÊÎÉ ÔÅÄÅÐÀÖÈÈ Çàì.íà÷àëüíèêà
Äåïàðòàìåíòà âåòåðèíàðèè
ÃËÀÂÍÎÅ ÓÏÐÀÂËÅÍÈÅ ÂÅÒÅÐÈÍÀÐÈÈ
N 13-7-2/1222 27 àïðåëÿ 1998 ã.
ÌÅÒÎÄÈ×ÅÑÊÈÅ ÓÊÀÇÀÍÈß
äëÿ âûÿâëåíèÿ àíòèòåë ê âèðó-
ñó èíôåêöèîííîãî áðîíõèòà êóð
èììóíîôåðìåíòíûì àíàëèçîì
1. ÎÁÙÈÅ ÏÎËÎÆÅÍÈß
1.1. Ñïåöèôè÷åñêèå àíòèòåëà ê âèðóñó èíôåêöèîííîãî áðîíõèòà
êóð (ÈÁÊ) âûÿâëÿþò â ñûâîðîòêàõ êðîâè ñ ïîìîùüþ íàáîðà
êîìïîíåíòîâ èììóíîôåðìåíòíûì àíàëèçîì (ÈÔÀ). Äëÿ ðåòðîñïåêòèâíîé
äèàãíîñòèêè áîëåçíè ó íåâàêöèíèðîâàííîãî ïòèöåïîãîëîâüÿ è
êîíòðîëÿ íàïðÿæåííîñòè ïîñòâàêöèíàëüíîãî èììóíèòåòà.
1.2. Â ñîñòàâ íàáîðà âõîäÿò:
— Êîìïîíåíò N1 (Ê1) — ïîëîæèòåëüíàÿ ñûâîðîòêà êðîâè êóð ê
âèðóñó ÈÁÊ (ïîëîæèòåëüíûé êîíòðîëü), ðàçâåäåííàÿ 1:100,
ëèîôèëèçèðîâàííàÿ, 1,0 ñìÇ — 1 àìïóëà (ôëàêîí);
— Êîìïîíåíò N2 (Ê2) — îòðèöàòåëüíàÿ ñûâîðîòêà êðîâè êóð
(îòðèöàòåëüíûé êîíòðîëü), íå ñîäåðæàùàÿ àíòèòåë ê âèðóñó ÈÁÊ,
ðàçâåäåííàÿ 1:100, ëèîôèëèçèðîâàííàÿ, 1,0 ñì3 — 1 àìïóëà (ôëàêîí);
— Êîìïîíåíò N3 (Ê3) — î÷èùåííûé àíòèãåí âèðóñà ÈÁÊ,
àäñîðáèðîâàííûé ïî î,1 ñì3 â ëóíêàõ ïëàíøåòà äëÿ ÈÔÀ-2 ïëàíøåòà;
— Êîìïîíåíò N4 (Ê4) — àíòèâèäîâîé èììóíîïèðîêñèäàçíûé
êîíüþãàò ïðîòèâ èììóíîãëîáóëèíîâ êóð, ëèîôèëèçèðîâàííûé, 0,2 èëè
0,5 ñìÇ — 1 àìïóëà (ôëàêîí);
— Êîìïîíåíò N5 (Ê5.1,; Ê5.2.; Ê5.3.) — íàáîð ñîëåé äëÿ
ïðèãîòîâëåíèÿ áóôåðíîãî ðàñòâîðà; õëîðèä íàòðèÿ (NaCl) — 8,76 ã
— 1 ôëàêîí; íàòðèé ôîñôîðíîêèñëûé äâóçàìåøåííûé (Nà2 HPO4 õ 12
H2 O) — 3, 58 ã — 1 ôëàêîí; êàëèé ôîñôîðíîêèñëûé îäíîçàìåøåííûé
(ÊÍ2 ÐÎ4) — 1,36 ã — 1 ôëàêîí. Êàæäàÿ ñîëü ôàñóåòñÿ â îòäåëüíûé
ôëàêîí.
— Êîìïîíåíò N6 (Ê6) — äåòåðãåíò òâèí-20 èëè òðèòîí Õ-100,
0,5 ñì3 — 1 ïðîáèðêà,
— êîìïîíåíò N7 (Ê7) — 5-àìèíîñàëèöèëîâàÿ êèñëîòà, ïîðîøîê,
ïî 20 ìã — 2 ïðîáèðêè;
— Êîìïîíåíò N8 (Ê8) — ãèäðîïåðèò — 0,5 ã òàáëåòêà â óïàêîâêå — 1 øò.
1.3. Ïî âíåøíåìó âèäó ïîëîæèòåëüíàÿ è îòðèöàòåëüíàÿ
ñûâîðîòêè êðîâè êóð ïðåäñòàâëÿþò ñîáîé ñóõóþ ãîìîãåííóþ ïîðèñòóþ
ìàññó áåëîãî öâåòà, ðàñôàñîâàíû â àìïóëû (ôëàêîíû) ïîä âàêóóìîì
èëè ïîä èíåðòíûì ãàçîì — àçîòîì.
1.4. Íà àìïóëû èëè ôëàêîíû ñ èììóíîñïåöèôè÷åñêèìè
êîìïîíåíòàìè íàêëåèâàþò ýòèêåòêè ñ óêàçàíèåì íàèìåíîâàíèÿ
ïðåïàðàòà, îáúåìà â àìïóëå, ôëàêîíå èëè ïðîáèðêå â ñì3,
ðàáî÷åãî ðàçâåäåíèÿ, íîìåðà ñåðèè, íîìåðà êîíòðîëÿ, ñðîêà
ãîäíîñòè.
Íà ôëàêîíû, ïðîáèðêè äëÿ ìèêðîïðîá ñ íåñïåöèôè÷åñêèìè
êîìïîíåíòàìè íàêëåèâàþò ýòèêåòêè, íà êîòîðûõ óêàçûâàþò
íàèìåíîâàíèå êîìïîíåíòîâ, èõ êîëè÷åñòâî â ñì3 èëè ìã.
1.5. Àìïóëû è ôëàêîíû óïàêîâûâàþò â êàðòîííûå êîðîáêè ñ
íàëè÷èåì ãíåçä èëè ïåðåãîðîäîê, îáåñïå÷èâàþùèõ íåïîäâèæíîñòü
àìïóë è öåëîñòíîñòü ïðåïàðàòà.
Íà êàæäóþ êîðîáêó ñ íàáîðîì íàêëåèâàþò ýòèêåòêó, íà êîòîðîé
óêàçûâàþò íàèìåíîâàíèå ïðåäïðèÿòèÿ-èçãîòîâèòåëÿ è åãî òîâàðíûé
çíàê, ïîëíîå íàçâàíèå íàáîðà, íîìåð ñåðèè, íîìåð êîíòðîëÿ,
íàçâàíèå è êîëè÷åñòâî àìïóë (ôëàêîíîâ, ïðîáèðîê) êàæäîãî
êîìïîíåíòà, âõîäÿùåãî â íàáîð, îáúåì êîìïîíåíòà â îäíîé àìïóëå
(ôëàêîíå, ïðîáèðêå), äàòó èçãîòîâëåíèÿ (ìåñÿö, ãîä), ñðîê
ãîäíîñòè, óñëîâèÿ õðàíåíèÿ è îáîçíà÷åíèå ÒÓ.
2. ÏÎÐßÄÎÊ ÏÐÈÌÅÍÅÍÈß
2.1. Äëÿ èññëåäîâàíèÿ â ëàáîðàòîðèþ äîñòàâëÿþò ñûâîðîòêó
êðîâè êóð îò 20-25 ãîëîâ (ïî 0,2-0,3 ñì3) èç ïòèöåõîçÿéñòâ, ãäå
èìååòñÿ ïîäîçðåíèå íà äàííîå çàáîëåâàíèå. Ðåêîìåíäóåòñÿ
ïðîâîäèòü äîñòàâêó ïàðíûõ ïðîá ñûâîðîòêè êðîâè, âçÿòîé â íà÷àëå
çàáîëåâàíèÿ è ïîâòîðíî ÷åðåç 10-14 äíåé. Îòîáðàííûå ïðîáû õðàíÿò
â ìîðîçèëüíîé êàìåðå áûòîâîãî õîëîäèëüíèêà è äîñòàâëÿþò
îäíîâðåìåííî.
2.2. Äëÿ îïðåäåëåíèÿ íàïðÿæåííîñòè ïîñòâàêöèíàëüíîãî
èììóíèòåòà â ëàáîðàòîðèþ äîñòàâëÿþò ñûâîðîòêè êðîâè îò
âàêöèíèðîâàííîãî ïòèöåïîãîëîâüÿ ñïóñòÿ 3-4 íåäåëè ïîñëå
ïðèìåíåíèÿ âàêöèíû ïðîòèâ èíôåêöèîííîãî áðîíõèòà êóð.
3. ÏÎÄÃÎÒÎÂÊÀ ÊÎÍÏÎÍÅÍÒÎÂ ÍÀÁÎÐÀ È ÎÁÎÐÓÄÎÂÀÍÈß
ÄËß ÏÐÎÂÅÄÅÍÈß ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈÉ
3.1. Äëÿ ïîñòàíîâêè ÈÔÀ èñïîëüçóþò îäíî- è âîñüìèêàíàëüíûå
àâòîìàòè÷åñêèå ïèïåòêè ñî ñìåííûìè íàêîíå÷íèêàìè ðàçíûõ îáúåìîâ,
òåðìîñòàò ñ òåìïåðàòóðîé íàãðåâà 37+-0,5Ñ, áûòîâîé
õîëîäèëüíèê, PH-ìåòð (òèï 121 èëè 340), ïðîìûâàþùåå óñòðîéòâî
ðó÷íîå èëè ïîëóàâòîìàòè÷åñêîå, ñïåêòðîôîòîìåòð ñ âåðòèêàëüíûì
ëó÷îì èëè ïîëíûé êîìïëåêò îáîðóäîâàíèÿ äëÿ ÈÔÀ.
3.2. Ïåðåä ïðèãîòîâëåíèåì ðàáî÷èõ ðàñòâîðîâ íàáîð ñ
êîìïîíåíòàìè âûäåðæèâàþò 30 ìèí ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå
(18-20°Ñ).
Ïðèãîòîâëåíèå ðàñòâîðîâ
3.3. Ðàñòâîð N1 — 0,01 Ì ôîñôàòíî-áóôåðíûé ðàñòâîð ñ
0,15 Ì õëîðèäîì íàòðèÿ pH 7,2-7,4 è òâèíîì-20 èëè òðèòîíîì Õ-100
äî êîíå÷íîé êîíöåíòðàöèè 0,05%. Äëÿ åãî ïðèãîòîâëåíèÿ èç íàáîðà
áåðóò ôëàêîí ñ êîìïîíåíòîì 5,1 (õëîðèä íàòðèÿ), ñîäåðæèìîå
êîòîðîãî âíîñÿò â ìåðíóþ êîëáó íà 1000 ñì3, ðàñòâîðÿþò
äèñòèëëèðîâàííîé âîäîé è äîâîäÿò îáúåì äî ìåòêè, ïîëó÷àÿ 0,15 Ì
ðàñòâîð õëîðèäà íàòðèÿ. Çàòåì îòäåëüíî íà ôèçèîëîãè÷åñêîì
ðàñòâîðå (î,85%-íûé ðàñòâîð õëîðèäà íàòðèÿ) ãîòîâÿò ðàñòâîðû «À»,
«Á».
Ðàñòâîð «À». Èç íàáîðà áåðóò ôëàêîí ñ êîìïîíåíòîì 5.2.
(íàòðèé ôîñôîðíîêèñëûé äâóçàìåøåííûé), ñîäåðæèìîå êîòîðîãî âíîñÿò
â ìåðíóþ êîëáó âìåñòèìîñòüþ 100 ñì3 è ðàñòâîðÿþò ôèçèîëîãè÷åñêèì
ðàñòâîðîì. Äëÿ áûñòðîãî ðàñòâîðåíèÿ íàâåñêè ñîëè — ñîäåðæèìîãî
ìåðíîé êîëáû — ðåêîìåíäóåòñÿ ïîäîãðåòü è îáüåì äîâåñòè äî ìåòêè
ôèçèîëîãè÷åñêèì ðàñòâîðîì.
Ðàñòâîð «Á», ãîòîâÿò ïóòåì ðàñòâîðåíèÿ ñîäåðæèìîãî ôëàêîíà —
êîìïîíåíòà 5, 3. (êàëèé ôîñôîðíîêèñëûé îäíîçàìåøåííûé) â
ôèçèîëîãè÷åñêîì ðàñòâîðå è äîâîäÿò äî 100 ñì3 â ìåðíîé êîëáå.
Äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ î,01 Ì ôîñôàòíî-áóôåðíîãî ðàñòâîðà ñ
0,15 Ì õëîðèäîì íàòðèÿ pH 7,2-7,4 (ÔÁÐ) ïðîâîäÿò ñìåøèâàíèå
ðàñòâîðîâ «À» è «Á» â ìåðíîé êîëáå îáúåìîì 1000 ñì3 â
ñëåäóþùèõ ñîîòíîøåíèÿõ: ðàñòâîð «À» — 85,0 ñì3 ðàñòâîð «Á» —
28,0 ñì3 è äîâîäÿò äî ìåòêè çàðàíåå ïðèãîòîâëåííûì 0,15 Ì
ðàñòâîðîì õëîðèäà íàòðèÿ, çàòåì çàìåðÿþò çíà÷åíèå ðÍ, êîòîðîå
äîëæíî áûòü â ïðåäåëàõ 7,2-7,4. Åñëè pH íèæå óêàçàííîãî óðîâíÿ,
äîáàâëÿþò íåîáõîäèìîå êîëè÷åñòâî ðàñòâîðà «À», åñëè âûøå —
ðàñòâîðà «Á».
Ïîñëå ïðèãîòîâëåíèÿ ÔÁÐ pH 7,2-7,4 â ýòîò ðàñòâîð âíîñÿò
ñîäåðæèìîå ïðîáèðêè — êîìïîíåíò 6 (òâèí-20), ïîëó÷àÿ êîíå÷íóþ
êîíöåíòðàöèþ äåòåðãåíòà 0,05%.
Äàííûé ðàñòâîð èñïîëüçóþò äëÿ ðàçâåäåíèÿ ïîëîæèòåëüíîé,
îòðèöàòåëüíîé, èññëåäóåìûõ ïðîá ñûâîðîòêè êðîâè êóð,
àíòèâèäîâîãî êîíúþãàòà, ïðîìûâêè ëóíîê ïëàíøåòà. Õðàíÿò íå áîëåå
20 ñóòîê â áûòîâîì õîëîäèëüíèêå (òåìïåðàòóðà íå âûøå 4° Ñ).
3.4. Ðàñòâîð N2 — ñîäåðæèìîå àìïóëû — êîìïîíåíò 1
(ïîëîæèòåëüíàÿ ñûâîðîòêà êðîâè êóð) ðàñòâîðÿþò â 2,0 ñì3
ðàñòâîðà N1, ïîëó÷àþò ðàçâåäåíèå ïîëîæèòåëüíîé ñûâîðîòêè 1:200.
Ãîòîâÿò ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì. Äîïóñêàåòñÿ õðàíåíèå â ìîðîçèëüíîé
êàìåðå áûòîâîãî õîëîäèëüíèêà äî 15 ñóòîê.
3.5. Ðàñòâîð N3 — ñîäåðæèìîå àìïóëû — êîìïîíåíò 2 (îòðè-
öàòåëüíàÿ ñûâîðîòêà êðîâè êóð) ðàñòâîðÿþò â 2,0 ñì3 ðàñòâîðà
N1, ïîëó÷àþò ðàçâåäåíèå îòðèöàòåëüíîé ñûâîðîòêè 1:200. Ãîòîâÿò
ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì. Äîïóñêàåòñÿ õðàíåíèå â ìîðîçèëüíîé
êàìåðå áûòîâîãî õîëîäèëüíèêà äî 15 ñóòîê.
3.6. ðàñòâîð N4 — ñîäåðæèìîå àìïóëû — êîìïîíåíò 4 (àíòè-
âèäîâîé êîíúþãàò) ðàñòâîðÿþò â 21 ñì 3 ðàñòâîðà N 1. Ãîòîâÿò
ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì. Äîïóñêàåòñÿ õðàíåíèå â ìîðîçèëüíîé êàìåðå
áûòîâîãî õîëîäèëüíèêà äî 15 ñóòîê,
3.7. Ðàñòâîð N5 — òàáëåòêó ãèäðîïåðèòà (êîìïîíåíò 8)
ðàñòâîðÿþò â 15 ñì3 äèñòèëëèðîâàííîé âîäû, ðàñòâîð õðàíÿò â
çàùèùåííîì îò ñâåòà ìåñòå ïðè 4-8 C íå áîëåå 15 ñóòîê.
3.8. Ðàñòâîð N6 ñóáñòðàòíî-èíäèêàòîðíàÿ ñìåñü, ñîäåðæèìîå
ôëàêîíà — êîìïîíåíò 7 (5-àìèíîñàëèöèëîâàÿ êèñëîòà) ðàñòâîðÿ-
þò â êîëáå â 21 ñì3 ïîäîãðåòîé äî 50-60 Ñ äèñòèëëèðîâàííîé
âîäû, ïåðåìåøèâàþò äî ïîëíîãî ðàñòâîðåíèÿ è ïðîñâåòëåíèÿ
ðàñòâîðà è îõëàæäàþò äî êîìíàòíîé òåìïåðàòóðû (18-20 Ñ). Çàòåì
äîâîäÿò pH äî 6,0+0,2 C ïîìîùüþ 1%-íîãî ðàñòâîðà ãèäðîîêèñè
íàòðèÿ è â ñîäåðæèìîå êîëáû äîáàâëÿþò 0,1 ñì3 ðàñòâîðà N5
(ãèäðîïåðèò). Ãîòîâÿò íåïîñðåäñòâåííî ïåðåä èñïîëüçîâàíèåì, íå
õðàíÿò.
4. ÏÐÎÂÅÄÅÍÈÅ ÈÌÌÍÓÍÎÔÅÐÌÅÍÒÍÎÃÎ ÀÍÀËÈÇÀ
4.1. Èç êîìïëåêòà íàáîðà áåðóò ïëàíøåò (êîìïîíåíò 3), â
ëóíêàõ êîòîðîãî àäñîðáèðîâàí î÷èùåííûé àíòèãåí âèðóñà èíôåêöèîí-
íîãî áðîíõèòà êóð è èñïîëüçóþò äëÿ ïîñòàíîâêè èììóíîôåðìåíòíîãî
àíàëèçà.
4.2. Ðàçâåäåíèå èñïûòóåìûõ ñûâîðîòîê.
Îáðàçöû èññëåäóåìûõ ïðîá ñûâîðîòîê êðîâè ðàçâîäÿò ðàñòâîðîì
N1. Ñ ýòîé öåëüþ ê 2,0 ñì3 óêàçàííîãî ðàñòâîðà äîáàâëÿþò 0,01
ñì3 ñûâîðîòêè êðîâè êóð, ïåðåìåøèâàþò è ïîëó÷àþò ðàçâåäåíèå
1:200.
4.3. Â òðè ëóíêè ïëàíøåòà âåðòèêàëüíîãî ðÿäà À1, B1, C1
âíîñÿò ïî 0,1 ñì3 ïîëîæèòåëüíîé ñûâîðîòêè êðîâè (ïîëîæèòåëüíûé
êîíòðîëü), à â òðè ñëåäóþùèå ëóíêè D1, Å1, F1 âíîñÿò ïî 0,1 ñì3
îòðèöàòåëüíîé ñûâîðîòêè êðîâè (îòðèöàòåëüíûé êîíòðîëü); ëóíêè
G1, H1 ñëóæàò äëÿ êîíòðîëÿ ðàñòâîðà êîíúþãàòà è
ñóáñòðàòíî-èíäèêàòîðíîé ñìåñè (ôîíîâûé êîíòðîëü), â êîòîðûå
âíîñÿò ïî 0,1 ñì3 ðàñòâîðà N 1.
4.4. Â îñòàëüíûå ëóíêè ïëàíøåòà ðÿäîâ Â2-Â12…Í2-H12
âíîñÿò ïî 0,1 ñì3 ðàñòâîðà N1, à â ëóíêè ãîðèçîíòàëüíîãî ðÿäà
À2-À12 — ïî 0,2 ñì3 èññëåäóåìûõ ïðîá ñûâîðîòêè êðîâè,
ïîäãîòîâëåííûõ ïî ï.4.2. è ïðîâîäÿò ðàñòèòðîâêó ïî âåðòèêàëüíûì
ðÿäàì, íà÷èíàÿ îò ðàçâåäåíèÿ 1:200 äî 1:25600. Ñ ýòîé öåëüþ èç
ëóíîê À2-À12 îòáèðàþò ïî 0,1 ñìÇ ðàçâåäåííûõ èññëåäóåìûõ
ñûâîðîòîê êðîâè è ïåðåíîñÿò â ëóíêè Â2-Â12 ñîîòâåòñòâóþùåãî
ðÿäà, ïèïåòèðóþò è ïðîâîäÿò äâóêðàòíûå ïîñëåäîâàòåëüíûå
ðàçâåäåíèÿ ïåðåíîñîì ïî 0,1 ñì3 â î÷åðåäíóþ ëóíêó âåðòèêàëüíîãî
ðÿäà, óäàëÿÿ èç ïîñëåäíèõ ëóíîê Í2-Í12 ïî î, 1 ñì3.
4.5. Ïëàíøåò îñòîðîæíî âñòðÿõèâàþò äëÿ ïåðåìåøèâàíèÿ
ñîäåðæèìîãî, çàêðûâàþò êðûøêîé è ïåðåíîñÿò â òåðìîñòàò
(37,0+0,5Ñ) íà 30 ìèí. Çàòåì ëóíêè ïëàíøåòà îñâîáîæäàþò îò
ñîäåðæèìîãî ïóòåì âûòðÿõèâàíèÿ, òðåõêðàòíî ïðîìûâàþò (ïî 3 ìèí)
ðàñòâîðîì N1 è ïîäñóøèâàþò (ïóòåì ïîñòóêèâàíèÿ ïëàíøåòîì ïî
ôèëüòðîâàëüíîé áóìàãå).
4.6. Ãîòîâÿò ðàñòâîð N4 ïî ï.3.6. è âíîñÿò âî âñå ëóíêè
ïëàíøåòà ïî 0,1 ñì3, çàòåì ïîìåùàþò â òåðìîñòàò íà 30 ìèí.
Ïîñëå ýòîãî ñîäåðæèìîå óäàëÿþò, ëóíêè òðåõêðàòíî ïðîìûâàþò,
óäàëÿþò ñîäåðæèìîå è ïîäñóøèâàþò ïóòåì ïîñòóêèâàíèÿ ïåðåâåðíóòûì
ïëàíøåòîì ïî ôèëüòðîâàëüíîé áóìàãå.
4.7. Ãîòîâÿò ðàñòâîð N6 ïî ï.3.6. âî âñå ëóíêè ïëàíøåòà
âíîñÿò ïî î,1 ñì3 ðàñòâîðà N6 — ñóáñòðàòíî-èíäèêàòîðíóþ ñìåñü
è îñòàâëÿþò ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå â òåìíîì ìåñòå íà 10-15 ìèí.
4.8. Âûÿâëåíèå ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë ìîæíî ïðîâîäèòü è áåç
ðàñòèòðîâêè èñïûòóåìûõ ñûâîðîòîê, â ýòîì ñëó÷àå âíà÷àëå ïðîâîäÿò
ðàñòèòðîâêó êîíòðîëüíûõ îáðàçöîâ ñûâîðîòîê: ïîëîæèòåëüíîé è
îòðèöàòåëüíîé.
Ïðåäâàðèòåëüíî â ëóíêè ïëàíøåòà îò Â11 è Â12 äî Í11 è Í12
âíîñÿò ïî 0,1 ñì3 ðàñòâîðà N1, à çàòåì â ëóíêè A11 è A12
âíîñÿò ïî 0,2 ñì3 ñîîòâåòñòâåííî ïîëîæèòåëüíîé è îòðèöàòåëüíîé
ñûâîðîòîê â ðàçâåäåíèÿ 1:200 è ïðîâîäÿò äâóêðàòíóþ ðàñòèòðîâêó
êîíòðîëüíûõ ñûâîðîòîê èç íàáîðà ïî âåðòèêàëüíûì ðÿäàì îò 1:200
äî 1:25600, óäàëÿÿ èç ïîñëåäíèõ ëóíîê ïî 0,1 ñì3 ñîäåðæèìîãî.
Äëÿ âèçóàëüíîãî è ñïåêòðîôîòîìåòðè÷åñêîãî ó÷åòà ðåçóëüòàòîâ
ðåàêöèè îáðàçöû èññëåäóåìûõ (èñïûòóåìûõ) ïðîá ñûâîðîòîê êðîâè
áåðóò â ðàçâåäåíèè 1:200 è âíîñÿò ïî 0,1 ñì3 â ñâîáîäíûå ëóíêè
ïëàíøåòà, èñïîëüçóÿ ïî îäíîé ëóíêå íà êàæäóþ ïðîáó.
Îñòàëüíûå ýòàïû ïîñòàíîâêè àíàëèçà ïðîâîäÿò àíàëîãè÷íî
ï.ï.4.6., 4.7., 4.8.
4.9. Ïðè ñïåêòðîôîòîìåòðè÷åñêîì ó÷åòå ðåçóëüòàòîâ àíàëèçà
âî âñå ëóíêè ïëàíøåòà äëÿ îñòàíîâêè ðåàêöèè íåîáõîäèìî âíåñòè ïî
0,05 ñì3 «ñòîï-ðåàãåíòà», ïðåäñòàâëÿþùåãî ñîáîé 0,5 Ì ðàñòâîð
ñåðíîé êèñëîòû (2 ñì3 H2 SO4 + 18,0 ñì3 äèñòèëëèðîâàííîé
âîäû).
5. Ó×ÅÒ ÐÅÇÓËÜÒÀÒΠÐÅÀÊÖÈÈ
5.1. Ó÷åò ðåçóëüòàòîâ àíàëèçà ïðîâîäÿò ÷åðåç 10-15 ìèí
îäíèì èç ñïîñîáîâ: âèçóàëüíî — ïî èíòåíñèâíîñòè îêðàøèâàíèÿ
ñîäåðæèìîãî ëóíîê ïëàíøåòà èëè èíñòðóìåíòàëüíî — ñ ïîìîùüþ
ñïåêòðîôîòîìåòðà ñ âåðòèêàëüíûì ëó÷îì ñâåòà ïóòåì èçìåðåíèÿ
îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè ïðè äëèíå âîëíû 450 íì.
5.2. Ïðè âèçóàëüíîé îöåíêå ðåçóëüòàòîâ ïåðâîíà÷àëüíî
ïðîâîäÿò ó÷åò ðåàêöèè ïî êîíòðîëüíûì ëóíêàì ïëàíøåòà: â ëóíêàõ ñ
ïîëîæèòåëüíîé ñûâîðîòêîé (ðÿä À11…Í11; ëóíêè À1, Â1, Ñ1)
îêðàøèâàíèå äîëæíî áûòü îò æåëòîâàòîãî äî òåìíî-êîðè÷íåâîãî
öâåòà. Ñ ðàçâåäåíèåì ïîëîæèòåëüíîé ñûâîðîòêè èíòåíñèâíîñòü
îêðàøèâàíèÿ óìåíüøàåòñÿ. Îêðàøèâàíèå ñîäåðæèìîãî ñ îòðèöàòåëüíîé
ñûâîðîòêîé è áåç ñûâîðîòêè (ôîíîâûé êîíòðîëü) äîëæíî
îòñóòñòâîâàòü èëè ñîäåðæèìîå ìîæåò èìåòü íåçíà÷èòåëüíóþ
æåëòîâàòóþ îêðàñêó (ðÿä À12…Í12; ëóíêè D1, Å1, F1, G1, H1).
Ðåàêöèÿ ó÷èòûâàåòñÿ ïðè ïðàâèëüíûõ ïîêàçàíèÿõ êîíòðîëåé. Ýòî
äàåò îñíîâàíèå ñ÷èòàòü, ÷òî êîìïîíåíòû íàáîðà ñîîòâåòñòâóþò
òðåáîâàíèÿì ÒÓ, è ìîæíî ïðèñòóïèòü ê ó÷åòó ðåàêöèè ñ ïðîáàìè
èñïûòóåìûõ ñûâîðîòîê.
5.3. Âèçóàëüíûé ó÷åò ðåçóëüòàòîâ îñíîâàí íà ñðàâíåíèè
èíòåíñèâíîñòè öâåòíîé îêðàñêè ñîäåðæèìîãî ëóíîê ïëàíøåòà
èñïûòóåìûõ ïðîá ñûâîðîòîê êðîâè ñ îêðàñêîé ëóíîê êîíòðîëüíîãî
ïîëîæèòåëüíîãî îáðàçöà (âåðòèêàëüíûé ðÿä À11…H11).
Èíòåíñèâíîñòü öâåòíîé ðåàêöèè ïðÿìîïðîïîðöèîíàëüíà êîëè÷åñòâó
àíòèòåë â èññëåäóåìûõ ïðîáàõ ñûâîðîòêè êðîâè. ×åì âûøå
èíòåíñèâíîñòü îêðàñêè ñîäåðæèìîãî ëóíîê (îò æåëòîâàòîãî äî
òåìíî-êîðè÷íåâîãî), òåì âûøå òèòð àíòèòåë â èññëåäóåìûõ ïðîáàõ.
5.4. Ïðè ïîñòàíîâêå ðåàêöèè áåç ðàñòèòðîâêè èñïûòóåìûõ ïðîá
òèòð ñûâîðîòêè îïðåäåëÿþò ïî èíòåíñèâíîñòè îêðàøèâàíèÿ
èñïûòóåìûõ ñûâîðîòîê â ñðàâíåíèè ñ èíòåíñèâíîñòüþ îêðàøèâàíèÿ
ðàçëè÷íûõ ðàçâåäåíèé ïîëîæèòåëüíîé êîíòðîëüíîé ñûâîðîòêè (ðÿä
À11…Í11), êîòîðàÿ ÿâëÿåòñÿ êàê áû ýòàëîííîé øêàëîé äëÿ îöåíêè
ðåçóëüòàòîâ.
 ñëó÷àå íåîáõîäèìîñòè òî÷íîãî îïðåäåëåíèÿ òèòðà ñûâîðîòêè
åå ðàñòèòðîâûâàþò êàê óêàçàíî â ï.4.4.
5.5. Ðàñòèòðîâêà ïðîá èñïûòóåìûõ ñûâîðîòîê êðîâè äàåò
âîçìîæíîñòü êîëè÷åñòâåííî îöåíèâàòü òèòð ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë.
Çà òèòð èñïûòóåìîé ñûâîðîòêè êðîâè ïðèíèìàþò åå ïîñëåäíåå
ðàçâåäåíèå, ïðè êîòîðîì íàáëþäàþò âèäèìîå ãëàçîì öâåòíîå
îêðàøèâàíèå ñîäåðæèìîãî ëóíîê, áîëåå èíòåíñèâíîå ïî ñðàâíåíèþ ñ
îêðàøèâàíèåì ñûâîðîòîê îòðèöàòåëüíîãî êîíòðîëÿ. Ïîëîæèòåëüíûìè
ñ÷èòàþòñÿ ïðîáû ñûâîðîòîê, èìåþùèå îêðàñêó ðàçíîé ñòåïåíè
èíòåíñèâíîñòè, ñîäåðæèìîå ëóíîê êîòîðûõ ñðàâíèìî ñ îêðàñêîé
ïîëîæèòåëüíîé êîíòðîëüíîé ñûâîðîòêè (ëóíêè ïëàíøåòà À11…Í11).
Îòðèöàòåëüíûìè ñ÷èòàþòñÿ ïðîáû ñûâîðîòîê, íå èçìåíèâøèõ
îêðàñêó èëè èìåþùèõ íåçíà÷èòåëüíîå æåëòîâàòîå îêðàøèâàíèå
ñîäåðæèìîãî ëóíîê, ñðàâíèìîå ñ îêðàøèâàíèåì îòðèöàòåëüíîé
êîíòðîëüíîé ñûâîðîòêè (ëóíêè ïëàíøåòà À12…Í12).
5.6. Èíñòðóìåíòàëüíûé — ñïåêòðîôîòîìåòðè÷åñêèé ó÷åò
ðåçóëüòàòîâ àíàëèçà ïîçâîëÿåò êîëè÷åñòâåííî îöåíèòü òèòðû
ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë â èññëåäóåìûõ ïðîáàõ ïóòåì èçìåðåíèé
îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè (ÎÏ) ïðè äëèíå âîëíû 450 íì ñ îäíîâðåìåííîé
çàïèñüþ ðåçóëüòàòîâ ñ êàæäîé ëóíêè ïëàíøåòà íà ëèñòå áóìàãè èëè
ñïåöèàëüíîé áóìàæíîé ëåíòå.
5.7. Ïðè ñïåêòðîôîòîìåòðè÷åñêîì ó÷åòå ðåçóëüòàòû îïòè÷åñêîé
ïëîòíîñòè âûðàæàþò â îïòè÷åñêèõ åäèíèöàõ.
Î ðåçóëüòàòàõ ðåàêöèè ñóäÿò ïî êîýôôèöèåíòó ñîîòíîøåíèé
ìåæäó ïîêàçàíèÿìè îïòè÷åñêèõ ïëîòíîñòåé èññëåäóåìûõ ïðîá
ñûâîðîòîê è òàêîâûì êîíòðîëüíîãî îáðàçöà.
Äëÿ ïîëîæèòåëüíîé ðåàêöèè êîýôôèöèåíò ñîîòíîøåíèé äîëæåí
ïðåâûøàòü áîëåå ÷åì â 2,1 ðàçà îïòè÷åñêóþ ïëîòíîñòü
îòðèöàòåëüíîãî êîíòðîëÿ ÷òî ñâèäåòåëüñòâóåò î âûÿâëåíèè
ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë ê âèðóñó ÈÁÊ â èññëåäóåìîé ïðîáå.
Äëÿ îòðèöàòåëüíîé ðåàêöèè êîýôôèöèåíò ñîîòíîøåíèé ìåæäó
ïîêàçàíèÿìè îïòè÷åñêèõ ïëîòíîñòåé äîëæåí áûòü ìåíüøå 2,0, ÷òî
ñâèäåòåëüñòâóåò îá îòñóòñòâèè ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë â
èññëåäóåìîé ïðîáå ñûâîðîòêè.
Åñëè êîýôôèöèåíò ñîîòíîøåíèé îïòè÷åñêèõ ïëîòíîñòåé ðàâåí
2,0, òî ðåàêöèÿ îöåíèâàåòñÿ êàê ñîìíèòåëüíàÿ, à èñïûòóåìàÿ ïðîáà
ñûâîðîòêè êðîâè ïîäëåæèò ïîâòîðíîìó èññëåäîâàíèþ è ïðè
ïîäòâåðæäåíèè ïåðâîíà÷àëüíîãî ðåçóëüòàòà ñ÷èòàåòñÿ ïîëîæèòåëüíîé.
6. ÎÖÅÍÊÀ ÐÅÇÓËÜÒÀÒÎÂ ÐÅÀÊÖÈÈ
6.1. Îáíàðóæåíèå ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë â èññëåäóåìûõ ïðîáàõ
ñûâîðîòîê â òèòðå îò 1:200 è âûøå ó 50 è áîëåå ïðîöåíòîâ
ïòèöåïîãîëîâüÿ, ãäå íå ïðîâîäèòñÿ ñïåöèôè÷åñêàÿ ïðîôèëàêòèêà
ïðîòèâ ÈÁÊ, ÿâëÿåòñÿ äèàãíîñòè÷åñêè ïîëîæèòåëüíûì òèòðîì è
ñâèäåòåëüñòâóåò î íåáëàãîïîëó÷èè è ïåðñèñòåíöèè ïîëåâîãî âèðóñà
ÈÁÊ â ïòèöåõîçÿéñòâå.  ýòîì ñëó÷àå ïîëîæèòåëüíûå ñûâîðîòêè
ðàñòèòðîâûâàþò è ïðè âûÿâëåíèè òèòðîâ àíòèòåë 1:800 è âûøå
ïðîâîäÿò âûäåëåíèå âèðóñà ÈÁÊ è ïîñòàíîâêó áèîïðîáû.
6.2. Ïðè èññëåäîâàíèè «ïàðíûõ» ïðîá ñûâîðîòîê êðîâè è
îáíàðóæåíèè íàðàñòàíèÿ òèòðà ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë â ÷åòûðå è
áîëåå ðàç íå ìåíåå, ÷åì ó 50% èññëåäóåìûõ ïðîá äàåò îñíîâàíèå
äëÿ ïîñòàíîêè äèàãíîçà íà èíôåêöèîííûé áðîíõèò êóð.
Îáíàðóæåíèå íàðàñòàíèÿ òèòðà àíòèòåë â èññëåäóåìûõ ïðîáàõ,
íå äîñòèãàþùåãî ÷åòûðåõêðàòíîãî óâåëè÷åíèÿ, èëè âûÿâëåíèå
íàðàñòàíèÿ òèòðà ìåíåå, ÷åì â 50% èñïûòóåìûõ ïðîá ñûâîðîòîê
êðîâè, ñëóæàò îñíîâàíèåì äëÿ ïðîâåäåíèÿ äîïîëíèòåëüíûõ
âèðóñîëîãè÷åñêèõ èññëåäîâàíèé.
6.3. Ïðè èñïîëüçîâàíèè íàáîðà äëÿ êîíòðîëÿ íàïðÿæåííîñòè
ïîñòâàêöèíàëüíîãî èììóíèòåòà èññëåäóþò ñûâîðîòêè êðîâè ÷åðåç ç-4
íåäåëè ïîñëå ïðèìåíåíèÿ âàêöèíû. Ïðè ýòîì óðîâåíü
ïîñòâàêöèíàëüíûõ àíòèòåë äîëæåí áûòü íå íèæå 1:400 áîëåå ÷åì â
80% èññëåäóåìûõ ïðîá ñûâîðîòîê.
Ìåòîäè÷åñêèå óêàçàíèÿ ðàçðàáîòàíû âåäóùèì íàó÷íûì ñîòðóäíè-
êîì îòäåëà âèðóñîëîãèè ÂÍÈÂÈÏ, êàíäèäàòîì âåòåðèíàðíûõ íàóê, îò-
âåòñòâåííûì ðàçðàáîò÷èêîì Ñåðãååâûì Â.Ä.
